临床和实验医学杂志
臨床和實驗醫學雜誌
림상화실험의학잡지
JOURNAL OF CLINICAL AND EXPERIMENTAL MEDICINE
2012年
9期
641-643
,共3页
钟毅%吴天一%于晓巍%黄野
鐘毅%吳天一%于曉巍%黃野
종의%오천일%우효외%황야
大鼠%脊髓损伤%PDK1%磷酸化
大鼠%脊髓損傷%PDK1%燐痠化
대서%척수손상%PDK1%린산화
目的 探讨3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1(PDKl)及磷酸化3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1(p-PDK1)在横断性脊髓损伤(tSCI)后的表达变化及意义.方法 将30只成年SD大鼠随机分为假手术对照组和T9横断伤6 h、12 h、1 d和3 d组,每组6只.采用Western blot方法检测损伤后各时间段PDK1和p-PDK1蛋白水平在脊髓中的表达变化;采用免疫组织化学方法检测p-PDK1在假手术对照组以及损伤组脊髓中的分布和定位;最后通过免疫荧光标记法检测p-PDK1在细胞中的定位.结果 Western blot和免疫组化显示PDKl蛋白表达在SCI后无明显变化,p-PDK1蛋白在SCI后表达增加,12 h达到高峰,之后逐渐下降,并于3 d恢复到假手术水平.免疫荧光双标显示p-PDK1神经元及少突胶质细胞存在大量共定位.结论 脊髓损伤后PDKl蛋白水平无变化而p-PDK1呈现明显的时空变化,提示在脊髓损伤后PDK1可能通过磷酸化参与了神经元及少突胶质细胞的病理生理过程,发挥抗凋亡的作用.
目的 探討3-燐痠肌醇依賴性蛋白激酶-1(PDKl)及燐痠化3-燐痠肌醇依賴性蛋白激酶-1(p-PDK1)在橫斷性脊髓損傷(tSCI)後的錶達變化及意義.方法 將30隻成年SD大鼠隨機分為假手術對照組和T9橫斷傷6 h、12 h、1 d和3 d組,每組6隻.採用Western blot方法檢測損傷後各時間段PDK1和p-PDK1蛋白水平在脊髓中的錶達變化;採用免疫組織化學方法檢測p-PDK1在假手術對照組以及損傷組脊髓中的分佈和定位;最後通過免疫熒光標記法檢測p-PDK1在細胞中的定位.結果 Western blot和免疫組化顯示PDKl蛋白錶達在SCI後無明顯變化,p-PDK1蛋白在SCI後錶達增加,12 h達到高峰,之後逐漸下降,併于3 d恢複到假手術水平.免疫熒光雙標顯示p-PDK1神經元及少突膠質細胞存在大量共定位.結論 脊髓損傷後PDKl蛋白水平無變化而p-PDK1呈現明顯的時空變化,提示在脊髓損傷後PDK1可能通過燐痠化參與瞭神經元及少突膠質細胞的病理生理過程,髮揮抗凋亡的作用.
목적 탐토3-린산기순의뢰성단백격매-1(PDKl)급린산화3-린산기순의뢰성단백격매-1(p-PDK1)재횡단성척수손상(tSCI)후적표체변화급의의.방법 장30지성년SD대서수궤분위가수술대조조화T9횡단상6 h、12 h、1 d화3 d조,매조6지.채용Western blot방법검측손상후각시간단PDK1화p-PDK1단백수평재척수중적표체변화;채용면역조직화학방법검측p-PDK1재가수술대조조이급손상조척수중적분포화정위;최후통과면역형광표기법검측p-PDK1재세포중적정위.결과 Western blot화면역조화현시PDKl단백표체재SCI후무명현변화,p-PDK1단백재SCI후표체증가,12 h체도고봉,지후축점하강,병우3 d회복도가수술수평.면역형광쌍표현시p-PDK1신경원급소돌효질세포존재대량공정위.결론 척수손상후PDKl단백수평무변화이p-PDK1정현명현적시공변화,제시재척수손상후PDK1가능통과린산화삼여료신경원급소돌효질세포적병리생리과정,발휘항조망적작용.
