CAJ | 학술논문

背景与目的:MT1-MMP(MMP-14)是新发现的一种膜型基质金属蛋白酶,研究表明MT1-MMP在肿瘤转移中发挥关键性作用.本研究应用反义核酸技术,观察了MT1-MMP反义核酸对高转移人卵巢癌SW626细胞体外生长和侵袭的抑制效应.方法:应用自行设计的引物,借助 RT-PCR技术获得两端含不同限制酶位点的MT1-MMPcDNA片段,反向插入pcDNA3.1中,并应用脂质体介导的基因转染技术,将重组质粒导入SW626细胞中,应用 MTT、Western blot、明胶酶谱和体外侵袭实验等方法观察了SW626细胞转染前后,细胞生长、MT1-MMP蛋白表达、MMP-2和MMP-9酶活性及细胞体外侵袭能力等指标的变化.结果:成功构建了反义MT1-MMP真核表达载体(pMMP14as),将其转染入 SW626细胞后,与空质粒转染组相比,MT1-MMP反义核酸转染组细胞MT1-MMP表达显著降低,抑制率为65.8%;MMP-2酶原的活化受到明显抑制;pMMP14as转染组的穿膜细胞百分数为( 63.3± 5.8)%,明显低于空质粒转染组(97.6±7.5)(P<0.05)%.结论:MT1-MMP反义核酸可明显抑制高转移SW626细胞体外生长和侵袭效应,提示MT1-MMP可作为人卵巢癌抗侵袭治疗的分子靶点.
배경여목적:MT1-MMP(MMP-14)시신발현적일충막형기질금속단백매,연구표명MT1-MMP재종류전이중발휘관건성작용.본연구응용반의핵산기술,관찰료MT1-MMP반의핵산대고전이인란소암SW626세포체외생장화침습적억제효응.방법:응용자행설계적인물,차조 RT-PCR기술획득량단함불동한제매위점적MT1-MMPcDNA편단,반향삽입pcDNA3.1중,병응용지질체개도적기인전염기술,장중조질립도입SW626세포중,응용 MTT、Western blot、명효매보화체외침습실험등방법관찰료SW626세포전염전후,세포생장、MT1-MMP단백표체、MMP-2화MMP-9매활성급세포체외침습능력등지표적변화.결과:성공구건료반의MT1-MMP진핵표체재체(pMMP14as),장기전염입 SW626세포후,여공질립전염조상비,MT1-MMP반의핵산전염조세포MT1-MMP표체현저강저,억제솔위65.8%;MMP-2매원적활화수도명현억제;pMMP14as전염조적천막세포백분수위( 63.3± 5.8)%,명현저우공질립전염조(97.6±7.5)(P<0.05)%.결론:MT1-MMP반의핵산가명현억제고전이SW626세포체외생장화침습효응,제시MT1-MMP가작위인란소암항침습치료적분자파점.