自然科学进展
自然科學進展
자연과학진전
zirankexuejinzhan
2004年
8期
870-881
,共12页
草鱼%补体C3%寄生虫感染
草魚%補體C3%寄生蟲感染
초어%보체C3%기생충감염
利用抑制差减杂交技术,构建了草鱼与大中华鳋感染相关的差减文库,测序得到一些免疫相关基因,其中包含与鲤补体C3高度同源的片段.根据此片段设计引物,采用RACE(rapidamplification of cDNA ends)技术,克隆了草鱼补体C3的cDNA,其全长5171 bp,编码1677个氨基酸.与已报道的补体C3一样,草鱼补体C3同样具有在功能上比较重要的残基以及保守的硫酯区.草鱼补体C3与高等脊椎动物鸡、小鼠以及人的C3在氨基酸序列上有着相近的相同率(37.9%～39.1%),与其他鱼类的比较显示与鲤的相同率最高,与鲤的3个基因型C3-H1,C3-H2,C3-S的相同率分别为80.5%,75.4%,79.2%.系统发育树也显示了草鱼补体C3与鲤补体C3,尤其是鲤C3-S基因型形成一簇.Southern杂交显示草鱼补体C3存在多个拷贝;虚拟Northern杂交和RT-PCR进一步证实所克隆到的补体C3在感染大中华鳋的草鱼中表达量增加,表明草鱼补体C3是一个与大中华鳋感染相关的基因.
利用抑製差減雜交技術,構建瞭草魚與大中華鳋感染相關的差減文庫,測序得到一些免疫相關基因,其中包含與鯉補體C3高度同源的片段.根據此片段設計引物,採用RACE(rapidamplification of cDNA ends)技術,剋隆瞭草魚補體C3的cDNA,其全長5171 bp,編碼1677箇氨基痠.與已報道的補體C3一樣,草魚補體C3同樣具有在功能上比較重要的殘基以及保守的硫酯區.草魚補體C3與高等脊椎動物鷄、小鼠以及人的C3在氨基痠序列上有著相近的相同率(37.9%～39.1%),與其他魚類的比較顯示與鯉的相同率最高,與鯉的3箇基因型C3-H1,C3-H2,C3-S的相同率分彆為80.5%,75.4%,79.2%.繫統髮育樹也顯示瞭草魚補體C3與鯉補體C3,尤其是鯉C3-S基因型形成一簇.Southern雜交顯示草魚補體C3存在多箇拷貝;虛擬Northern雜交和RT-PCR進一步證實所剋隆到的補體C3在感染大中華鳋的草魚中錶達量增加,錶明草魚補體C3是一箇與大中華鳋感染相關的基因.
이용억제차감잡교기술,구건료초어여대중화소감염상관적차감문고,측서득도일사면역상관기인,기중포함여리보체C3고도동원적편단.근거차편단설계인물,채용RACE(rapidamplification of cDNA ends)기술,극륭료초어보체C3적cDNA,기전장5171 bp,편마1677개안기산.여이보도적보체C3일양,초어보체C3동양구유재공능상비교중요적잔기이급보수적류지구.초어보체C3여고등척추동물계、소서이급인적C3재안기산서렬상유착상근적상동솔(37.9%～39.1%),여기타어류적비교현시여리적상동솔최고,여리적3개기인형C3-H1,C3-H2,C3-S적상동솔분별위80.5%,75.4%,79.2%.계통발육수야현시료초어보체C3여리보체C3,우기시리C3-S기인형형성일족.Southern잡교현시초어보체C3존재다개고패;허의Northern잡교화RT-PCR진일보증실소극륭도적보체C3재감염대중화소적초어중표체량증가,표명초어보체C3시일개여대중화소감염상관적기인.
