新疆农业大学学报
新疆農業大學學報
신강농업대학학보
JOURNAL OF XINJIANG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2006年
4期
32-36
,共5页
李萍%艾秀莲%危晓薇%孟庆玉%王博%王志方%黄乐平
李萍%艾秀蓮%危曉薇%孟慶玉%王博%王誌方%黃樂平
리평%애수련%위효미%맹경옥%왕박%왕지방%황악평
农杆菌介导%PBP基因%遗传转化%棉花
農桿菌介導%PBP基因%遺傳轉化%棉花
농간균개도%PBP기인%유전전화%면화
雪莲磷脂酰乙醇胺结合蛋白(Phosphatidyl ethanolamine-binding family protein, PBP)基因表达产物与细胞膜的冷稳定性有关,可能在植物抗寒方面起一定作用.本研究将XLPBP基因以农杆菌介导的方法转化新陆早17号、新陆早13号、新陆早1号3个品种陆地棉,通过对不同激素浓度、预培养时间、菌液浓度和浸菌时间等因素对转化培养物的影响以及茎段外植体对卡那霉素(Kan)的敏感性等方面的探讨,确定了新陆早13号外植体材料(茎段)的最佳转化条件,即:在OD600为0.4的农杆菌菌液中侵染10 min,在茎段最适培养基(含0.1 mg/L KT和0.1 mg/L 2,4-D,pH5.8)上进行预培养2 d,共培养2 d,转至不含选择压的培养基(含Cef 500 mg/L)上进行延迟培养7 d,再进行选择培养,茎段愈伤分化达25%(诱导出愈伤组织的外植体数占接种的外植体数)以上;茎段转化适宜的选择压力为Kan 50 mg/L;在获得的抗性愈伤中8%左右经检测为GUS阳性.
雪蓮燐脂酰乙醇胺結閤蛋白(Phosphatidyl ethanolamine-binding family protein, PBP)基因錶達產物與細胞膜的冷穩定性有關,可能在植物抗寒方麵起一定作用.本研究將XLPBP基因以農桿菌介導的方法轉化新陸早17號、新陸早13號、新陸早1號3箇品種陸地棉,通過對不同激素濃度、預培養時間、菌液濃度和浸菌時間等因素對轉化培養物的影響以及莖段外植體對卡那黴素(Kan)的敏感性等方麵的探討,確定瞭新陸早13號外植體材料(莖段)的最佳轉化條件,即:在OD600為0.4的農桿菌菌液中侵染10 min,在莖段最適培養基(含0.1 mg/L KT和0.1 mg/L 2,4-D,pH5.8)上進行預培養2 d,共培養2 d,轉至不含選擇壓的培養基(含Cef 500 mg/L)上進行延遲培養7 d,再進行選擇培養,莖段愈傷分化達25%(誘導齣愈傷組織的外植體數佔接種的外植體數)以上;莖段轉化適宜的選擇壓力為Kan 50 mg/L;在穫得的抗性愈傷中8%左右經檢測為GUS暘性.
설련린지선을순알결합단백(Phosphatidyl ethanolamine-binding family protein, PBP)기인표체산물여세포막적랭은정성유관,가능재식물항한방면기일정작용.본연구장XLPBP기인이농간균개도적방법전화신륙조17호、신륙조13호、신륙조1호3개품충륙지면,통과대불동격소농도、예배양시간、균액농도화침균시간등인소대전화배양물적영향이급경단외식체대잡나매소(Kan)적민감성등방면적탐토,학정료신륙조13호외식체재료(경단)적최가전화조건,즉:재OD600위0.4적농간균균액중침염10 min,재경단최괄배양기(함0.1 mg/L KT화0.1 mg/L 2,4-D,pH5.8)상진행예배양2 d,공배양2 d,전지불함선택압적배양기(함Cef 500 mg/L)상진행연지배양7 d,재진행선택배양,경단유상분화체25%(유도출유상조직적외식체수점접충적외식체수)이상;경단전화괄의적선택압력위Kan 50 mg/L;재획득적항성유상중8%좌우경검측위GUS양성.
