肿瘤
腫瘤
종류
TUMOR
2007年
5期
352-356
,共5页
范天黎%许培荣%袁保梅%侯桂琴%姜国忠%卢洁%杨观瑞
範天黎%許培榮%袁保梅%侯桂琴%薑國忠%盧潔%楊觀瑞
범천려%허배영%원보매%후계금%강국충%로길%양관서
凋亡诱导因子%细胞凋亡%RNA,小分子干扰,基因,p63
凋亡誘導因子%細胞凋亡%RNA,小分子榦擾,基因,p63
조망유도인자%세포조망%RNA,소분자간우,기인,p63
目的:探讨凋亡诱导因子(AIF)在TAp63γ诱导细胞凋亡中的作用.方法:将质粒pcDNA3.1-TAp63γ转入人食管鳞癌EC9706细胞,抽提细胞DNA检测细胞是否凋亡,流式细胞仪检测凋亡率,并用亚细胞器分离技术分析AIF的转位;利用化学合成及基因重组技术构建AIF发夹状RNA表达载体,western blot检测干扰效果并用流式细胞仪分析凋亡率的变化.结果:pcDNA3.1-TAp63γ转染细胞24 h后出现DNA ladder,凋亡率为13.64%,并在pcDNA3.1-TAp63γ转染组中细胞质和细胞核蛋白中检测到AIF;而空载体转染组则无DNA ladder,凋亡率为1.37%,且此组的细胞质和细胞核蛋白尤其是核蛋白内无AIF信号.成功构建表达发夹状AIF-siRNA的载体,其干扰效率约为80%.转染pcDNA3.1-TAo63γ 24 h后,AIF-siRNA组的凋亡率是4.52%.结论:TAp63γ基因表达可诱导EC9706细胞凋亡;下调AIF的蛋白表达水平可降低TAp63γ诱导的细胞凋亡.
目的:探討凋亡誘導因子(AIF)在TAp63γ誘導細胞凋亡中的作用.方法:將質粒pcDNA3.1-TAp63γ轉入人食管鱗癌EC9706細胞,抽提細胞DNA檢測細胞是否凋亡,流式細胞儀檢測凋亡率,併用亞細胞器分離技術分析AIF的轉位;利用化學閤成及基因重組技術構建AIF髮夾狀RNA錶達載體,western blot檢測榦擾效果併用流式細胞儀分析凋亡率的變化.結果:pcDNA3.1-TAp63γ轉染細胞24 h後齣現DNA ladder,凋亡率為13.64%,併在pcDNA3.1-TAp63γ轉染組中細胞質和細胞覈蛋白中檢測到AIF;而空載體轉染組則無DNA ladder,凋亡率為1.37%,且此組的細胞質和細胞覈蛋白尤其是覈蛋白內無AIF信號.成功構建錶達髮夾狀AIF-siRNA的載體,其榦擾效率約為80%.轉染pcDNA3.1-TAo63γ 24 h後,AIF-siRNA組的凋亡率是4.52%.結論:TAp63γ基因錶達可誘導EC9706細胞凋亡;下調AIF的蛋白錶達水平可降低TAp63γ誘導的細胞凋亡.
목적:탐토조망유도인자(AIF)재TAp63γ유도세포조망중적작용.방법:장질립pcDNA3.1-TAp63γ전입인식관린암EC9706세포,추제세포DNA검측세포시부조망,류식세포의검측조망솔,병용아세포기분리기술분석AIF적전위;이용화학합성급기인중조기술구건AIF발협상RNA표체재체,western blot검측간우효과병용류식세포의분석조망솔적변화.결과:pcDNA3.1-TAp63γ전염세포24 h후출현DNA ladder,조망솔위13.64%,병재pcDNA3.1-TAp63γ전염조중세포질화세포핵단백중검측도AIF;이공재체전염조칙무DNA ladder,조망솔위1.37%,차차조적세포질화세포핵단백우기시핵단백내무AIF신호.성공구건표체발협상AIF-siRNA적재체,기간우효솔약위80%.전염pcDNA3.1-TAo63γ 24 h후,AIF-siRNA조적조망솔시4.52%.결론:TAp63γ기인표체가유도EC9706세포조망;하조AIF적단백표체수평가강저TAp63γ유도적세포조망.
