中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2010年
5期
596-601
,共6页
叶艳清%李国平%蒲泽锦%黄官友%冯家琳%韦碧柳%吴灵飞
葉豔清%李國平%蒲澤錦%黃官友%馮傢琳%韋碧柳%吳靈飛
협염청%리국평%포택금%황관우%풍가림%위벽류%오령비
腺苷%细胞凋亡%内质网应激%HepG2细胞%Caspase-3、4%CHOP
腺苷%細胞凋亡%內質網應激%HepG2細胞%Caspase-3、4%CHOP
선감%세포조망%내질망응격%HepG2세포%Caspase-3、4%CHOP
目的 探讨腺苷(ADO)诱导人类肝癌HepG2细胞凋亡的分子机制.方法 将不同浓度的ADO(0～6 mmol·L-1)作用于HepG2细胞36 h,采用MTT法测定ADO抑制细胞增殖效应.将HepG2细胞暴露于不同浓度的ADO(0～4 mmol·L-1)作用36 h或2 mmol·L-1ADO作用不同时间(0～48 h),观察细胞核的形态学改变;观察2 mmol·L-1ADO处理12 h和24 h后细胞周期的变化;观察2 mmol·L-1ADO作用前后Caspase-3和CHOP的亚细胞定位的变化;用Western blot检测不同浓度ADO作用后HepG2细胞Caspase-3,Caspase-4,CHOP,JNK的蛋白表达变化.结果 ADO对HepG2细胞生长有明显的抑制作用,不同浓度ADO(0.5,1,2,4,6 mmol·L-1)处理HepG2细胞36 h后,与对照组相比,相对细胞存活数分别下降13.48%±0.12%, 27.92%±0.25%, 35.21%±0.42%, 51.46%±0.24%, 71.42%±0.58%,呈现剂量依赖性;不同浓度ADO作用36 h或2 mmol·L-1ADO作用不同时间(0～48 h)后,随着ADO浓度的增加或作用时间的延长,HepG2细胞核发生典型核固缩、核碎裂、核分解等凋亡形态学改变;2 mmol·L-1ADO作用12 h或24 h后,细胞周期分析出现亚二倍体峰,提示细胞发生凋亡,对照组、ADD处理12 h及24 h组细胞凋亡率分别为1.55%±0.12%、10.96%±0.07%和21.04%±0.26%;2 mmol·L-1ADO诱导Caspase-3和CHOP表达增加,并从胞质易位进入胞核内;随着ADO浓度的升高,Caspase-4,Caspase-3,CHOP的表达均升高,均呈现剂量依赖性;而JNK的表达则没有变化.结论 腺苷诱导HepG2细胞凋亡与内质网应激途径有关.
目的 探討腺苷(ADO)誘導人類肝癌HepG2細胞凋亡的分子機製.方法 將不同濃度的ADO(0～6 mmol·L-1)作用于HepG2細胞36 h,採用MTT法測定ADO抑製細胞增殖效應.將HepG2細胞暴露于不同濃度的ADO(0～4 mmol·L-1)作用36 h或2 mmol·L-1ADO作用不同時間(0～48 h),觀察細胞覈的形態學改變;觀察2 mmol·L-1ADO處理12 h和24 h後細胞週期的變化;觀察2 mmol·L-1ADO作用前後Caspase-3和CHOP的亞細胞定位的變化;用Western blot檢測不同濃度ADO作用後HepG2細胞Caspase-3,Caspase-4,CHOP,JNK的蛋白錶達變化.結果 ADO對HepG2細胞生長有明顯的抑製作用,不同濃度ADO(0.5,1,2,4,6 mmol·L-1)處理HepG2細胞36 h後,與對照組相比,相對細胞存活數分彆下降13.48%±0.12%, 27.92%±0.25%, 35.21%±0.42%, 51.46%±0.24%, 71.42%±0.58%,呈現劑量依賴性;不同濃度ADO作用36 h或2 mmol·L-1ADO作用不同時間(0～48 h)後,隨著ADO濃度的增加或作用時間的延長,HepG2細胞覈髮生典型覈固縮、覈碎裂、覈分解等凋亡形態學改變;2 mmol·L-1ADO作用12 h或24 h後,細胞週期分析齣現亞二倍體峰,提示細胞髮生凋亡,對照組、ADD處理12 h及24 h組細胞凋亡率分彆為1.55%±0.12%、10.96%±0.07%和21.04%±0.26%;2 mmol·L-1ADO誘導Caspase-3和CHOP錶達增加,併從胞質易位進入胞覈內;隨著ADO濃度的升高,Caspase-4,Caspase-3,CHOP的錶達均升高,均呈現劑量依賴性;而JNK的錶達則沒有變化.結論 腺苷誘導HepG2細胞凋亡與內質網應激途徑有關.
목적 탐토선감(ADO)유도인류간암HepG2세포조망적분자궤제.방법 장불동농도적ADO(0～6 mmol·L-1)작용우HepG2세포36 h,채용MTT법측정ADO억제세포증식효응.장HepG2세포폭로우불동농도적ADO(0～4 mmol·L-1)작용36 h혹2 mmol·L-1ADO작용불동시간(0～48 h),관찰세포핵적형태학개변;관찰2 mmol·L-1ADO처리12 h화24 h후세포주기적변화;관찰2 mmol·L-1ADO작용전후Caspase-3화CHOP적아세포정위적변화;용Western blot검측불동농도ADO작용후HepG2세포Caspase-3,Caspase-4,CHOP,JNK적단백표체변화.결과 ADO대HepG2세포생장유명현적억제작용,불동농도ADO(0.5,1,2,4,6 mmol·L-1)처리HepG2세포36 h후,여대조조상비,상대세포존활수분별하강13.48%±0.12%, 27.92%±0.25%, 35.21%±0.42%, 51.46%±0.24%, 71.42%±0.58%,정현제량의뢰성;불동농도ADO작용36 h혹2 mmol·L-1ADO작용불동시간(0～48 h)후,수착ADO농도적증가혹작용시간적연장,HepG2세포핵발생전형핵고축、핵쇄렬、핵분해등조망형태학개변;2 mmol·L-1ADO작용12 h혹24 h후,세포주기분석출현아이배체봉,제시세포발생조망,대조조、ADD처리12 h급24 h조세포조망솔분별위1.55%±0.12%、10.96%±0.07%화21.04%±0.26%;2 mmol·L-1ADO유도Caspase-3화CHOP표체증가,병종포질역위진입포핵내;수착ADO농도적승고,Caspase-4,Caspase-3,CHOP적표체균승고,균정현제량의뢰성;이JNK적표체칙몰유변화.결론 선감유도HepG2세포조망여내질망응격도경유관.
