中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2010年
24期
4430-4434
,共5页
袁亚婷%江岳鑫%尹小文%江兴堂
袁亞婷%江嶽鑫%尹小文%江興堂
원아정%강악흠%윤소문%강흥당
甲醛%石蜡包埋组织%DNA提取
甲醛%石蠟包埋組織%DNA提取
갑철%석사포매조직%DNA제취
背景:由于在甲醛固定石蜡包埋组织的制作及保存过程中对DNA造成的损害,影响了后续的聚合酶链反应等研究.选择一种简便有效且经济实用的石蜡包埋组织DNA提取方法成为研究者们关注和亟待解决的问题.目的:比较甲醛固定石蜡包埋组织中4种提取DNA的方法对DNA质量的影响,探讨一种操作简便、污染少、经济实用的石蜡包埋组织中提取DNA的方法.方法:取手术切除的普通甲醛固定石蜡包埋的非小细胞肺癌组织标本20例,分别以二甲苯脱蜡-酚氯仿法、改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法、试剂盒法和改良TES水浴脱蜡-试剂盒抽提DNA法提取其DNA,然后进行电泳分析、紫外分光光度计测定A260/A280比值及PCR扩增.结果与结论:改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法和改良TES水浴脱蜡-试剂盒抽提DNA法可获得较大的DNA片段,且两种方法与试剂盒法所提取DNA的A260/A280值相比较,均有显著性意义(P<0.05),4种方法的提取效率差异无显著性意义(P>0.1),以改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法所得DNA为模板,扩增的目的条带亮度与阳性对照相当.结果证实改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法简便有效,所用试剂价格低廉,是一种经济实用的石蜡包埋组织DNA提取方法.
揹景:由于在甲醛固定石蠟包埋組織的製作及保存過程中對DNA造成的損害,影響瞭後續的聚閤酶鏈反應等研究.選擇一種簡便有效且經濟實用的石蠟包埋組織DNA提取方法成為研究者們關註和亟待解決的問題.目的:比較甲醛固定石蠟包埋組織中4種提取DNA的方法對DNA質量的影響,探討一種操作簡便、汙染少、經濟實用的石蠟包埋組織中提取DNA的方法.方法:取手術切除的普通甲醛固定石蠟包埋的非小細胞肺癌組織標本20例,分彆以二甲苯脫蠟-酚氯倣法、改良TES水浴脫蠟-酚氯倣法、試劑盒法和改良TES水浴脫蠟-試劑盒抽提DNA法提取其DNA,然後進行電泳分析、紫外分光光度計測定A260/A280比值及PCR擴增.結果與結論:改良TES水浴脫蠟-酚氯倣法和改良TES水浴脫蠟-試劑盒抽提DNA法可穫得較大的DNA片段,且兩種方法與試劑盒法所提取DNA的A260/A280值相比較,均有顯著性意義(P<0.05),4種方法的提取效率差異無顯著性意義(P>0.1),以改良TES水浴脫蠟-酚氯倣法所得DNA為模闆,擴增的目的條帶亮度與暘性對照相噹.結果證實改良TES水浴脫蠟-酚氯倣法簡便有效,所用試劑價格低廉,是一種經濟實用的石蠟包埋組織DNA提取方法.
배경:유우재갑철고정석사포매조직적제작급보존과정중대DNA조성적손해,영향료후속적취합매련반응등연구.선택일충간편유효차경제실용적석사포매조직DNA제취방법성위연구자문관주화극대해결적문제.목적:비교갑철고정석사포매조직중4충제취DNA적방법대DNA질량적영향,탐토일충조작간편、오염소、경제실용적석사포매조직중제취DNA적방법.방법:취수술절제적보통갑철고정석사포매적비소세포폐암조직표본20례,분별이이갑분탈사-분록방법、개량TES수욕탈사-분록방법、시제합법화개량TES수욕탈사-시제합추제DNA법제취기DNA,연후진행전영분석、자외분광광도계측정A260/A280비치급PCR확증.결과여결론:개량TES수욕탈사-분록방법화개량TES수욕탈사-시제합추제DNA법가획득교대적DNA편단,차량충방법여시제합법소제취DNA적A260/A280치상비교,균유현저성의의(P<0.05),4충방법적제취효솔차이무현저성의의(P>0.1),이개량TES수욕탈사-분록방법소득DNA위모판,확증적목적조대량도여양성대조상당.결과증실개량TES수욕탈사-분록방법간편유효,소용시제개격저렴,시일충경제실용적석사포매조직DNA제취방법.
