脑与神经疾病杂志
腦與神經疾病雜誌
뇌여신경질병잡지
JOURNAL OF BRAIN AND NERVOUS DISEASES
2011年
5期
321-323
,共3页
α-突触核蛋白%慢病毒载体%转染%PCR%West blotting
α-突觸覈蛋白%慢病毒載體%轉染%PCR%West blotting
α-돌촉핵단백%만병독재체%전염%PCR%West blotting
目的 构建SNCA基因过表达慢病毒质粒,转染293T细胞,建立稳定转染细胞系.方法 应用PCR技术扩增目的 基因,并将扩增产物插入慢病毒载体质粒pGC-FU上,并对阳性克隆进行基因测序鉴定.pGC-FU-SNCA-GFP重组质粒包装293T细胞,转染24小时后,用荧光显微镜观察标签GFP绿色荧光蛋白的表达,并用West blotting法测定目的 蛋白的表达.结果 成功构建了pGC-FU-SNCA-GFP慢病毒过表达质粒,获得了稳定转染的293T细胞株.结论 人SNCA基因过表达慢病毒载体成功,构建和稳定转染 293T细胞系的建立,为进一步体外研究α-突触核蛋白的功能奠定了基础.
目的 構建SNCA基因過錶達慢病毒質粒,轉染293T細胞,建立穩定轉染細胞繫.方法 應用PCR技術擴增目的 基因,併將擴增產物插入慢病毒載體質粒pGC-FU上,併對暘性剋隆進行基因測序鑒定.pGC-FU-SNCA-GFP重組質粒包裝293T細胞,轉染24小時後,用熒光顯微鏡觀察標籤GFP綠色熒光蛋白的錶達,併用West blotting法測定目的 蛋白的錶達.結果 成功構建瞭pGC-FU-SNCA-GFP慢病毒過錶達質粒,穫得瞭穩定轉染的293T細胞株.結論 人SNCA基因過錶達慢病毒載體成功,構建和穩定轉染 293T細胞繫的建立,為進一步體外研究α-突觸覈蛋白的功能奠定瞭基礎.
목적 구건SNCA기인과표체만병독질립,전염293T세포,건립은정전염세포계.방법 응용PCR기술확증목적 기인,병장확증산물삽입만병독재체질립pGC-FU상,병대양성극륭진행기인측서감정.pGC-FU-SNCA-GFP중조질립포장293T세포,전염24소시후,용형광현미경관찰표첨GFP록색형광단백적표체,병용West blotting법측정목적 단백적표체.결과 성공구건료pGC-FU-SNCA-GFP만병독과표체질립,획득료은정전염적293T세포주.결론 인SNCA기인과표체만병독재체성공,구건화은정전염 293T세포계적건립,위진일보체외연구α-돌촉핵단백적공능전정료기출.
