胰腺病学
胰腺病學
이선병학
CHINESE JOURNAL OF PANCREATOLOGY
2006年
2期
88-91
,共4页
王春刚%韩玲%张晓青%郁成雨%唐古生%姚雨石
王春剛%韓玲%張曉青%鬱成雨%唐古生%姚雨石
왕춘강%한령%장효청%욱성우%당고생%요우석
小干扰RNA%DNA-PKcs%辐射耐受性%胰腺肿瘤
小榦擾RNA%DNA-PKcs%輻射耐受性%胰腺腫瘤
소간우RNA%DNA-PKcs%복사내수성%이선종류
目的探讨稳定表达的siRNA抑制DNA-PKcs基因表达对胰腺癌细胞BxPC-3放射敏感性的影响.方法以人胰腺癌细胞BxPC-3为研究对象,将预先设计的siRNA与质粒连接.构建质粒与阴性对照质粒分别转化大肠杆菌,经克隆、扩增、纯化后转染BxPC-3细胞,潮霉素筛选,以半定量Western blot检测靶蛋白表达变化,用细胞克隆计数实验检测放射敏感性变化.结果成功构建以DNA-PKcs基因mRNA为靶序列的pSilencer2.1质粒,经潮霉素筛选出稳定的整合目的质粒的BxPC-3细胞,DNA-PKcs蛋白被抑制最大达到83%,实验组D0、Dq及SF2(1.284 ± 0.017、4.006 ± 0.023和0.567 ± 0.045)均明显低于阴性对照组(1.458 ± 0.026、4.840 ± 0.019和0.833 ± 0.076)(P ＜ 0.001).SER为1.47.结论针对DNA-PKcs基因的siRNA表达载体稳定转染人胰腺癌细胞BxPC-3,能够引发DNA-PKcs表达抑制,进而产生放射增敏作用.
目的探討穩定錶達的siRNA抑製DNA-PKcs基因錶達對胰腺癌細胞BxPC-3放射敏感性的影響.方法以人胰腺癌細胞BxPC-3為研究對象,將預先設計的siRNA與質粒連接.構建質粒與陰性對照質粒分彆轉化大腸桿菌,經剋隆、擴增、純化後轉染BxPC-3細胞,潮黴素篩選,以半定量Western blot檢測靶蛋白錶達變化,用細胞剋隆計數實驗檢測放射敏感性變化.結果成功構建以DNA-PKcs基因mRNA為靶序列的pSilencer2.1質粒,經潮黴素篩選齣穩定的整閤目的質粒的BxPC-3細胞,DNA-PKcs蛋白被抑製最大達到83%,實驗組D0、Dq及SF2(1.284 ± 0.017、4.006 ± 0.023和0.567 ± 0.045)均明顯低于陰性對照組(1.458 ± 0.026、4.840 ± 0.019和0.833 ± 0.076)(P ＜ 0.001).SER為1.47.結論針對DNA-PKcs基因的siRNA錶達載體穩定轉染人胰腺癌細胞BxPC-3,能夠引髮DNA-PKcs錶達抑製,進而產生放射增敏作用.
목적탐토은정표체적siRNA억제DNA-PKcs기인표체대이선암세포BxPC-3방사민감성적영향.방법이인이선암세포BxPC-3위연구대상,장예선설계적siRNA여질립련접.구건질립여음성대조질립분별전화대장간균,경극륭、확증、순화후전염BxPC-3세포,조매소사선,이반정량Western blot검측파단백표체변화,용세포극륭계수실험검측방사민감성변화.결과성공구건이DNA-PKcs기인mRNA위파서렬적pSilencer2.1질립,경조매소사선출은정적정합목적질립적BxPC-3세포,DNA-PKcs단백피억제최대체도83%,실험조D0、Dq급SF2(1.284 ± 0.017、4.006 ± 0.023화0.567 ± 0.045)균명현저우음성대조조(1.458 ± 0.026、4.840 ± 0.019화0.833 ± 0.076)(P ＜ 0.001).SER위1.47.결론침대DNA-PKcs기인적siRNA표체재체은정전염인이선암세포BxPC-3,능구인발DNA-PKcs표체억제,진이산생방사증민작용.
