CAJ | 학술논문

目的探讨高氧对新生大鼠肺caspase-3和p53基因表达及肺细胞凋亡的影响.方法采用Spraque-Dawley新生大鼠95%氧气暴露建立高氧肺损伤模型.应用RT-PCR技术检测肺组织caspase-3 mRNA 和p53 mRNA水平,凝胶电泳条带用成像系统照相分析结果.计算目的基因PCR产物条带与内参照β-actin条带光密度值的比值,作为p53基因的相对表达量,结果以±s标记,而caspase-3 mRNA表达量则以阳性表达或阴性表达为标记.应用脱氧核糖核酸转移酶介导的细胞凋亡标记技术(TUNEL)原位检测细胞凋亡. 光镜下随机计算5个视野中500个肺细胞中的阳性细胞数,结果以±s标记.结果新生大鼠暴露于95%氧浓度环境中24 h后肺组织中p53 mRNA表达中度增加(q=3.2305,P＞ 0.05),48 h后表达显著增加,与空气对照组相比差异有统计学意义(q=7.2941,P< 0.05).新生鼠高氧处理72 h、96 h后, 肺组织p53 mRNA表达又恢复到正常水平.在各空气对照组和各高氧处理组中个别新生鼠肺的caspase-3 mRNA有微量表达,绝大多数新生鼠肺的caspase-3 mRNA没有表达,差异无统计学意义.95%氧暴露7天的新生鼠肺细胞凋亡水平明显高于空气暴露组新生鼠肺细胞凋亡水平,两者比较差异有极显著的统计学意义(F=100,P<0.001).结论在高浓度供氧下,肺组织通过暂时上调p53基因的表达,介导细胞周期停滞,阻止G0/G1期细胞进入S期,抑制细胞分裂、增殖,同时p53促进细胞凋亡,从而导致肺生长发育受阻和肺损伤.新生鼠暴露于95%氧环境中,肺组织caspase-3 基因基本上不表达,因此推测高氧肺细胞凋亡可能存在不经过caspase-3的凋亡途径.
목적탐토고양대신생대서폐caspase-3화p53기인표체급폐세포조망적영향.방법채용Spraque-Dawley신생대서95%양기폭로건립고양폐손상모형.응용RT-PCR기술검측폐조직caspase-3 mRNA 화p53 mRNA수평,응효전영조대용성상계통조상분석결과.계산목적기인PCR산물조대여내삼조β-actin조대광밀도치적비치,작위p53기인적상대표체량,결과이±s표기,이caspase-3 mRNA표체량칙이양성표체혹음성표체위표기.응용탈양핵당핵산전이매개도적세포조망표기기술(TUNEL)원위검측세포조망. 광경하수궤계산5개시야중500개폐세포중적양성세포수,결과이±s표기.결과신생대서폭로우95%양농도배경중24 h후폐조직중p53 mRNA표체중도증가(q=3.2305,P＞ 0.05),48 h후표체현저증가,여공기대조조상비차이유통계학의의(q=7.2941,P< 0.05).신생서고양처리72 h、96 h후, 폐조직p53 mRNA표체우회복도정상수평.재각공기대조조화각고양처리조중개별신생서폐적caspase-3 mRNA유미량표체,절대다수신생서폐적caspase-3 mRNA몰유표체,차이무통계학의의.95%양폭로7천적신생서폐세포조망수평명현고우공기폭로조신생서폐세포조망수평,량자비교차이유겁현저적통계학의의(F=100,P<0.001).결론재고농도공양하,폐조직통과잠시상조p53기인적표체,개도세포주기정체,조지G0/G1기세포진입S기,억제세포분렬、증식,동시p53촉진세포조망,종이도치폐생장발육수조화폐손상.신생서폭로우95%양배경중,폐조직caspase-3 기인기본상불표체,인차추측고양폐세포조망가능존재불경과caspase-3적조망도경.