第一军医大学学报
第一軍醫大學學報
제일군의대학학보
JOURNAL OF FIRST MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2005年
4期
377-379,402
,共4页
刘美莉%熊轶%蔡继业%潘运龙%孟凡义%李凌松
劉美莉%熊軼%蔡繼業%潘運龍%孟凡義%李凌鬆
류미리%웅질%채계업%반운룡%맹범의%리릉송
胚胎干细胞%定向分化%胰岛样细胞团%原子力显微镜%可视化
胚胎榦細胞%定嚮分化%胰島樣細胞糰%原子力顯微鏡%可視化
배태간세포%정향분화%이도양세포단%원자력현미경%가시화
目的体外诱导Balb/C小鼠胚胎干细胞定向分化为胰岛样细胞团,观察细胞表面形态学的变化.方法选用Balb/C小鼠ES细胞,经过拟胚体(EB)发育分化4 d后开始定向诱导培养,不同时间段分别向细胞培养基中添加碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子-1和尼克酰胺和N等细胞生长因子,使ES细胞定向分化为胰岛样细胞团.免疫细胞化学检测表达胰岛素和胰高血糖素的阳性细胞.原子力显微镜(AFM)原位扫描阳性细胞团.结果EB细胞生长为大小不一、境界清楚的细胞团,细胞团内细胞排列紧密.胰岛B细胞数量多,主要分布在细胞团的中央,边缘少,染色较淡.而表达胰高血糖素的A细胞主要分布在细胞团的边缘,数量相对较少.AFM扫描可见表达胰岛素的阳性细胞团,其表面有很多类似神经纤维束,接成网络状.在细胞质中,还有很多类圆形的颗粒物质,其大小几乎一致,粒径都处于0.5~1.0μm间.结论诱导分化得到的细胞团不仅有形态和功能上的成熟,而且还具备良好的组织结构,为细胞的移植疗法提供了可靠的凭据.
目的體外誘導Balb/C小鼠胚胎榦細胞定嚮分化為胰島樣細胞糰,觀察細胞錶麵形態學的變化.方法選用Balb/C小鼠ES細胞,經過擬胚體(EB)髮育分化4 d後開始定嚮誘導培養,不同時間段分彆嚮細胞培養基中添加堿性成纖維細胞生長因子、胰島素樣生長因子-1和尼剋酰胺和N等細胞生長因子,使ES細胞定嚮分化為胰島樣細胞糰.免疫細胞化學檢測錶達胰島素和胰高血糖素的暘性細胞.原子力顯微鏡(AFM)原位掃描暘性細胞糰.結果EB細胞生長為大小不一、境界清楚的細胞糰,細胞糰內細胞排列緊密.胰島B細胞數量多,主要分佈在細胞糰的中央,邊緣少,染色較淡.而錶達胰高血糖素的A細胞主要分佈在細胞糰的邊緣,數量相對較少.AFM掃描可見錶達胰島素的暘性細胞糰,其錶麵有很多類似神經纖維束,接成網絡狀.在細胞質中,還有很多類圓形的顆粒物質,其大小幾乎一緻,粒徑都處于0.5~1.0μm間.結論誘導分化得到的細胞糰不僅有形態和功能上的成熟,而且還具備良好的組織結構,為細胞的移植療法提供瞭可靠的憑據.
목적체외유도Balb/C소서배태간세포정향분화위이도양세포단,관찰세포표면형태학적변화.방법선용Balb/C소서ES세포,경과의배체(EB)발육분화4 d후개시정향유도배양,불동시간단분별향세포배양기중첨가감성성섬유세포생장인자、이도소양생장인자-1화니극선알화N등세포생장인자,사ES세포정향분화위이도양세포단.면역세포화학검측표체이도소화이고혈당소적양성세포.원자력현미경(AFM)원위소묘양성세포단.결과EB세포생장위대소불일、경계청초적세포단,세포단내세포배렬긴밀.이도B세포수량다,주요분포재세포단적중앙,변연소,염색교담.이표체이고혈당소적A세포주요분포재세포단적변연,수량상대교소.AFM소묘가견표체이도소적양성세포단,기표면유흔다유사신경섬유속,접성망락상.재세포질중,환유흔다류원형적과립물질,기대소궤호일치,립경도처우0.5~1.0μm간.결론유도분화득도적세포단불부유형태화공능상적성숙,이차환구비량호적조직결구,위세포적이식요법제공료가고적빙거.