第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2005年
15期
1423-1426
,共4页
黄亚渝%童卫%郭立安%耿信笃
黃亞渝%童衛%郭立安%耿信篤
황아투%동위%곽립안%경신독
核糖核酸酶%蛋白折叠%疏水作用色谱%离子交换色谱
覈糖覈痠酶%蛋白摺疊%疏水作用色譜%離子交換色譜
핵당핵산매%단백절첩%소수작용색보%리자교환색보
目的:研究还原变性的核糖核酸酶(RNase)在高效疏水作用色谱(HPHIC)及高效离子交换色谱(HPIEC)上的复性及影响因素.方法:在二硫苏糖醇(DTT)存在的条件下用盐酸胍(GuHCl)和尿素(Urea)将RNase变性还原,先在溶液中加入氧化型谷胱苷肽(GSSG)进行氧化,然后在流动相中有低浓度变性剂存在的条件下,用HPHIC,HPIEC及稀释法对其进行复性并测定其生物活性及回收率.结果:HPHIC和HPIEC对RNase的复性效率均高于稀释法,两者的色谱固定相对RNase的复性均有所贡献.在色谱流动相中加入低浓度的变性剂可以提高复性效率,改变GSSG的浓度对复性效率也有影响.结论:用HPHIC,HPIEC对RNase进行复性,不仅复性效率高,而且快速、简便,具有很好的应用前景.
目的:研究還原變性的覈糖覈痠酶(RNase)在高效疏水作用色譜(HPHIC)及高效離子交換色譜(HPIEC)上的複性及影響因素.方法:在二硫囌糖醇(DTT)存在的條件下用鹽痠胍(GuHCl)和尿素(Urea)將RNase變性還原,先在溶液中加入氧化型穀胱苷肽(GSSG)進行氧化,然後在流動相中有低濃度變性劑存在的條件下,用HPHIC,HPIEC及稀釋法對其進行複性併測定其生物活性及迴收率.結果:HPHIC和HPIEC對RNase的複性效率均高于稀釋法,兩者的色譜固定相對RNase的複性均有所貢獻.在色譜流動相中加入低濃度的變性劑可以提高複性效率,改變GSSG的濃度對複性效率也有影響.結論:用HPHIC,HPIEC對RNase進行複性,不僅複性效率高,而且快速、簡便,具有很好的應用前景.
목적:연구환원변성적핵당핵산매(RNase)재고효소수작용색보(HPHIC)급고효리자교환색보(HPIEC)상적복성급영향인소.방법:재이류소당순(DTT)존재적조건하용염산고(GuHCl)화뇨소(Urea)장RNase변성환원,선재용액중가입양화형곡광감태(GSSG)진행양화,연후재류동상중유저농도변성제존재적조건하,용HPHIC,HPIEC급희석법대기진행복성병측정기생물활성급회수솔.결과:HPHIC화HPIEC대RNase적복성효솔균고우희석법,량자적색보고정상대RNase적복성균유소공헌.재색보류동상중가입저농도적변성제가이제고복성효솔,개변GSSG적농도대복성효솔야유영향.결론:용HPHIC,HPIEC대RNase진행복성,불부복성효솔고,이차쾌속、간편,구유흔호적응용전경.
