吉林大学学报（医学版）
吉林大學學報（醫學版）
길림대학학보（의학판）
JOURNAL OF JILIN UNIVERSITY(MEDICINE EDITION)
2006年
1期
18-22
,共5页
大肠杆菌O157%网状分枝扩增方法%环形探针%聚合酶链反应/方法
大腸桿菌O157%網狀分枝擴增方法%環形探針%聚閤酶鏈反應/方法
대장간균O157%망상분지확증방법%배형탐침%취합매련반응/방법
目的:建立一种简便、快速、灵敏和特异的检测食品和临床标本中大肠埃希菌O157:H7及其他产志贺样毒大肠埃希菌(STEC)的方法.方法:设计并合成了检测志贺毒素2(stx2)基因特异的环形探针和捕获探针,确定网状分枝扩增方法(RAM)的灵敏度;含有stx2基因的不同血清型的菌株包括O46:H38、O22:H8、O111:NM,用于RAM特异度的测定.用RAM检测所有分离的菌株,并进一步对瞬时RAM进行研究.结果:RAM最低能检测10个拷贝的stx2合成靶基因和临床分离的菌株,表明RAM与PCR具有一样的灵敏度.特异度的测定结果表明不同血清型的大肠埃希菌均为stx2阳性,而非致病性大肠埃希菌ATCC23716则为阴性.在32株菌株中,28株细菌含有stx2基因,其余则为阴性,与PCR检测结果100%一致.瞬时RAM结果也表明最低能检测10个细菌,检测信号的出现依赖于样品的浓度.结论:RAM的简便和等温扩增特点可替代PCR检测各种标本中大肠埃希菌O157:H7和STEC.
目的:建立一種簡便、快速、靈敏和特異的檢測食品和臨床標本中大腸埃希菌O157:H7及其他產誌賀樣毒大腸埃希菌(STEC)的方法.方法:設計併閤成瞭檢測誌賀毒素2(stx2)基因特異的環形探針和捕穫探針,確定網狀分枝擴增方法(RAM)的靈敏度;含有stx2基因的不同血清型的菌株包括O46:H38、O22:H8、O111:NM,用于RAM特異度的測定.用RAM檢測所有分離的菌株,併進一步對瞬時RAM進行研究.結果:RAM最低能檢測10箇拷貝的stx2閤成靶基因和臨床分離的菌株,錶明RAM與PCR具有一樣的靈敏度.特異度的測定結果錶明不同血清型的大腸埃希菌均為stx2暘性,而非緻病性大腸埃希菌ATCC23716則為陰性.在32株菌株中,28株細菌含有stx2基因,其餘則為陰性,與PCR檢測結果100%一緻.瞬時RAM結果也錶明最低能檢測10箇細菌,檢測信號的齣現依賴于樣品的濃度.結論:RAM的簡便和等溫擴增特點可替代PCR檢測各種標本中大腸埃希菌O157:H7和STEC.
목적:건립일충간편、쾌속、령민화특이적검측식품화림상표본중대장애희균O157:H7급기타산지하양독대장애희균(STEC)적방법.방법:설계병합성료검측지하독소2(stx2)기인특이적배형탐침화포획탐침,학정망상분지확증방법(RAM)적령민도;함유stx2기인적불동혈청형적균주포괄O46:H38、O22:H8、O111:NM,용우RAM특이도적측정.용RAM검측소유분리적균주,병진일보대순시RAM진행연구.결과:RAM최저능검측10개고패적stx2합성파기인화림상분리적균주,표명RAM여PCR구유일양적령민도.특이도적측정결과표명불동혈청형적대장애희균균위stx2양성,이비치병성대장애희균ATCC23716칙위음성.재32주균주중,28주세균함유stx2기인,기여칙위음성,여PCR검측결과100%일치.순시RAM결과야표명최저능검측10개세균,검측신호적출현의뢰우양품적농도.결론:RAM적간편화등온확증특점가체대PCR검측각충표본중대장애희균O157:H7화STEC.
