免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2006年
6期
629-634
,共6页
沈国顺%金宁一%秦晓光%尹荣兰%庄天中%马鸣潇%郑敏
瀋國順%金寧一%秦曉光%尹榮蘭%莊天中%馬鳴瀟%鄭敏
침국순%금저일%진효광%윤영란%장천중%마명소%정민
PRRSV病毒%ORF5/ORF3基因%核酸疫苗%免疫
PRRSV病毒%ORF5/ORF3基因%覈痠疫苗%免疫
PRRSV병독%ORF5/ORF3기인%핵산역묘%면역
目的 获得安全有效的防治PRRSV核酸疫苗.方法 采用RT-PCR方法扩增了PRRSV长春分离株ORF5、ORF3基因,并将其插入真核表达载体PVAX1、pVIR-IL-18的CMV启动子下游,构建成真核表达质粒pVAX1-ORF5-ORF3和pVIR-IL18-ORF5-ORF3,通过Western blot及IFA等检测目的基因表达产物.同时进行了Balb/c小鼠免疫试验,检测免疫后小鼠的ELISA抗体水平和脾T淋巴细胞亚群数量.结果 所构建的2个重组DNA疫苗质粒在真核细胞能进行有效的转录,并表达了目的蛋白(GP5、GP3).pVIR-IL18-ORF5-ORF3免疫组的小鼠的ELISA抗体水平高于pVAX1-ORF5-ORF3和PRRS灭活苗免疫组,但差异不显著.CD8+T淋巴细胞亚群数量显著高于pVAX1-ORF5-ORF3和PRRS灭活苗组.结论 IL-18对猪的细胞免疫功能具有明显的促进作用.
目的 穫得安全有效的防治PRRSV覈痠疫苗.方法 採用RT-PCR方法擴增瞭PRRSV長春分離株ORF5、ORF3基因,併將其插入真覈錶達載體PVAX1、pVIR-IL-18的CMV啟動子下遊,構建成真覈錶達質粒pVAX1-ORF5-ORF3和pVIR-IL18-ORF5-ORF3,通過Western blot及IFA等檢測目的基因錶達產物.同時進行瞭Balb/c小鼠免疫試驗,檢測免疫後小鼠的ELISA抗體水平和脾T淋巴細胞亞群數量.結果 所構建的2箇重組DNA疫苗質粒在真覈細胞能進行有效的轉錄,併錶達瞭目的蛋白(GP5、GP3).pVIR-IL18-ORF5-ORF3免疫組的小鼠的ELISA抗體水平高于pVAX1-ORF5-ORF3和PRRS滅活苗免疫組,但差異不顯著.CD8+T淋巴細胞亞群數量顯著高于pVAX1-ORF5-ORF3和PRRS滅活苗組.結論 IL-18對豬的細胞免疫功能具有明顯的促進作用.
목적 획득안전유효적방치PRRSV핵산역묘.방법 채용RT-PCR방법확증료PRRSV장춘분리주ORF5、ORF3기인,병장기삽입진핵표체재체PVAX1、pVIR-IL-18적CMV계동자하유,구건성진핵표체질립pVAX1-ORF5-ORF3화pVIR-IL18-ORF5-ORF3,통과Western blot급IFA등검측목적기인표체산물.동시진행료Balb/c소서면역시험,검측면역후소서적ELISA항체수평화비T림파세포아군수량.결과 소구건적2개중조DNA역묘질립재진핵세포능진행유효적전록,병표체료목적단백(GP5、GP3).pVIR-IL18-ORF5-ORF3면역조적소서적ELISA항체수평고우pVAX1-ORF5-ORF3화PRRS멸활묘면역조,단차이불현저.CD8+T림파세포아군수량현저고우pVAX1-ORF5-ORF3화PRRS멸활묘조.결론 IL-18대저적세포면역공능구유명현적촉진작용.
