中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2007年
8期
1598-1601
,共4页
李宏武%姚克%金红颖%孙丽霞
李宏武%姚剋%金紅穎%孫麗霞
리굉무%요극%금홍영%손려하
蛋白质组%电泳,凝胶,双向%光谱分析,质量%晶体
蛋白質組%電泳,凝膠,雙嚮%光譜分析,質量%晶體
단백질조%전영,응효,쌍향%광보분석,질량%정체
目的:建立人晶状体上皮细胞蛋白质组研究体系,探讨双向电泳和质谱鉴定技术在人晶状体上皮细胞蛋白质组研究中的作用.方法:体外培养人晶状体上皮细胞株,用两种不同方法提取总蛋白,进行固相pH梯度(IPG)等电聚焦双向凝胶电泳,凝胶通过GS-800扫描仪(Bio-Rad)获取图像并使用PDQuest专业图像分析软件分析.在此基础之上,胰酶消化蛋白质斑点并进行质谱分析.结果:获得了重复性较好的人晶状体上皮细胞蛋白质组电泳图谱.晶状体蛋白质斑点在等电点pH值为4-7、相对分子质量为17-72 kD之间均有分布.其中高丰度蛋白点主要分布于分子量19-50 kD、PI 5-7范围内.2个蛋白点通过质谱分析和数据库的检索得到了初步的鉴定.结论:建立起了一个稳定的分析人晶状体上皮细胞蛋白质组学实验体系;为进一步研究人类晶状体在生理状态及白内障等病理条件下的改变提供了蛋白质组学的研究方法和途径.
目的:建立人晶狀體上皮細胞蛋白質組研究體繫,探討雙嚮電泳和質譜鑒定技術在人晶狀體上皮細胞蛋白質組研究中的作用.方法:體外培養人晶狀體上皮細胞株,用兩種不同方法提取總蛋白,進行固相pH梯度(IPG)等電聚焦雙嚮凝膠電泳,凝膠通過GS-800掃描儀(Bio-Rad)穫取圖像併使用PDQuest專業圖像分析軟件分析.在此基礎之上,胰酶消化蛋白質斑點併進行質譜分析.結果:穫得瞭重複性較好的人晶狀體上皮細胞蛋白質組電泳圖譜.晶狀體蛋白質斑點在等電點pH值為4-7、相對分子質量為17-72 kD之間均有分佈.其中高豐度蛋白點主要分佈于分子量19-50 kD、PI 5-7範圍內.2箇蛋白點通過質譜分析和數據庫的檢索得到瞭初步的鑒定.結論:建立起瞭一箇穩定的分析人晶狀體上皮細胞蛋白質組學實驗體繫;為進一步研究人類晶狀體在生理狀態及白內障等病理條件下的改變提供瞭蛋白質組學的研究方法和途徑.
목적:건립인정상체상피세포단백질조연구체계,탐토쌍향전영화질보감정기술재인정상체상피세포단백질조연구중적작용.방법:체외배양인정상체상피세포주,용량충불동방법제취총단백,진행고상pH제도(IPG)등전취초쌍향응효전영,응효통과GS-800소묘의(Bio-Rad)획취도상병사용PDQuest전업도상분석연건분석.재차기출지상,이매소화단백질반점병진행질보분석.결과:획득료중복성교호적인정상체상피세포단백질조전영도보.정상체단백질반점재등전점pH치위4-7、상대분자질량위17-72 kD지간균유분포.기중고봉도단백점주요분포우분자량19-50 kD、PI 5-7범위내.2개단백점통과질보분석화수거고적검색득도료초보적감정.결론:건립기료일개은정적분석인정상체상피세포단백질조학실험체계;위진일보연구인류정상체재생리상태급백내장등병리조건하적개변제공료단백질조학적연구방법화도경.