畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2009年
3期
8-11
,共4页
唐源%杨鹤峰%王开功%周碧君%罗阿东%文明
唐源%楊鶴峰%王開功%週碧君%囉阿東%文明
당원%양학봉%왕개공%주벽군%라아동%문명
产气荚膜梭菌%肠毒素基因%克隆%鉴定
產氣莢膜梭菌%腸毒素基因%剋隆%鑒定
산기협막사균%장독소기인%극륭%감정
参考相关资料,针对产气荚膜梭菌肠毒素基因(cpe)设计合成1对特异性引物,对34株贵州分离株进行PCR扩增,并将扩增产物连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5a感受态细胞,提取质粒进行PCR和双酶切鉴定后测序和分析.结果在34株产气荚膜梭菌贵州分离株中有I株c型菌株扩增出与预期大小相一致的目的片段,经克隆测序后,该片段大小为233 bp,其与产气荚膜梭菌参考株肠毒素基因序列的核苷酸同源性为99.6%～100%,推导氨基酸同源性为98.7%～100%,表明所扩增产物为产气荚膜梭菌的肠毒索基因片段.本试验筛选鉴定出1株产气荚膜梭菌cpe+菌株,为今后进一步探讨产气荚膜梭菌性食物中毒机制奠定了基础.
參攷相關資料,針對產氣莢膜梭菌腸毒素基因(cpe)設計閤成1對特異性引物,對34株貴州分離株進行PCR擴增,併將擴增產物連接到pMD18-T載體,轉化至大腸桿菌DH5a感受態細胞,提取質粒進行PCR和雙酶切鑒定後測序和分析.結果在34株產氣莢膜梭菌貴州分離株中有I株c型菌株擴增齣與預期大小相一緻的目的片段,經剋隆測序後,該片段大小為233 bp,其與產氣莢膜梭菌參攷株腸毒素基因序列的覈苷痠同源性為99.6%～100%,推導氨基痠同源性為98.7%～100%,錶明所擴增產物為產氣莢膜梭菌的腸毒索基因片段.本試驗篩選鑒定齣1株產氣莢膜梭菌cpe+菌株,為今後進一步探討產氣莢膜梭菌性食物中毒機製奠定瞭基礎.
삼고상관자료,침대산기협막사균장독소기인(cpe)설계합성1대특이성인물,대34주귀주분리주진행PCR확증,병장확증산물련접도pMD18-T재체,전화지대장간균DH5a감수태세포,제취질립진행PCR화쌍매절감정후측서화분석.결과재34주산기협막사균귀주분리주중유I주c형균주확증출여예기대소상일치적목적편단,경극륭측서후,해편단대소위233 bp,기여산기협막사균삼고주장독소기인서렬적핵감산동원성위99.6%～100%,추도안기산동원성위98.7%～100%,표명소확증산물위산기협막사균적장독색기인편단.본시험사선감정출1주산기협막사균cpe+균주,위금후진일보탐토산기협막사균성식물중독궤제전정료기출.
