江西农业大学学报
江西農業大學學報
강서농업대학학보
ACTA AGRICULTURAE UNIVERSITATIS JIANGXIENSIS
2010年
2期
350-355
,共6页
纪少珲%王喜宏%季维智%金立方
紀少琿%王喜宏%季維智%金立方
기소혼%왕희굉%계유지%금립방
小鼠胎儿成纤维细胞%同步化处理%组蛋白%甲基化%乙酰化
小鼠胎兒成纖維細胞%同步化處理%組蛋白%甲基化%乙酰化
소서태인성섬유세포%동보화처리%조단백%갑기화%을선화
供体细胞的同步化处理可能改变其表观遗传特性,进而影响胚胎的克隆效率.研究同步化处理对小鼠胎儿成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts, MEFs)组蛋白H3K9甲基化、乙酰化及组蛋白H3K4单甲基化、三甲基化表达的影响.分离培养MEFs,增殖稳定的第3代MEFs分别用5 mL/L血清饥饿处理4 d或15 mL/L DMSO处理2 d使细胞处于增殖抑制期,通过免疫组化染色和Image-J图像处理软件,相对定量比较不同处理情况下组蛋白H3K9甲基化、乙酰化和组蛋白H3K4单甲基化、三甲基化变化情况.Ki-67染色检测结果表明,两种同步化处理可使细胞处于G0期或G1期.DMSO处理使MEFs组蛋白H3K9乙酰化表达水平升高,而5 mL/L血清饥饿处理则使其表达水平下降;此外,两种同步化处理均导致组蛋白H3K9甲基化和H3K4单甲基化表达下降,但不影响组蛋白H3K4三甲基化的表达水平. 研究结论表明:同步化处理可改变MEFs组蛋白乙酰化和甲基化表达水平,进而有可能影响胚胎克隆效率.
供體細胞的同步化處理可能改變其錶觀遺傳特性,進而影響胚胎的剋隆效率.研究同步化處理對小鼠胎兒成纖維細胞(mouse embryonic fibroblasts, MEFs)組蛋白H3K9甲基化、乙酰化及組蛋白H3K4單甲基化、三甲基化錶達的影響.分離培養MEFs,增殖穩定的第3代MEFs分彆用5 mL/L血清饑餓處理4 d或15 mL/L DMSO處理2 d使細胞處于增殖抑製期,通過免疫組化染色和Image-J圖像處理軟件,相對定量比較不同處理情況下組蛋白H3K9甲基化、乙酰化和組蛋白H3K4單甲基化、三甲基化變化情況.Ki-67染色檢測結果錶明,兩種同步化處理可使細胞處于G0期或G1期.DMSO處理使MEFs組蛋白H3K9乙酰化錶達水平升高,而5 mL/L血清饑餓處理則使其錶達水平下降;此外,兩種同步化處理均導緻組蛋白H3K9甲基化和H3K4單甲基化錶達下降,但不影響組蛋白H3K4三甲基化的錶達水平. 研究結論錶明:同步化處理可改變MEFs組蛋白乙酰化和甲基化錶達水平,進而有可能影響胚胎剋隆效率.
공체세포적동보화처리가능개변기표관유전특성,진이영향배태적극륭효솔.연구동보화처리대소서태인성섬유세포(mouse embryonic fibroblasts, MEFs)조단백H3K9갑기화、을선화급조단백H3K4단갑기화、삼갑기화표체적영향.분리배양MEFs,증식은정적제3대MEFs분별용5 mL/L혈청기아처리4 d혹15 mL/L DMSO처리2 d사세포처우증식억제기,통과면역조화염색화Image-J도상처리연건,상대정량비교불동처리정황하조단백H3K9갑기화、을선화화조단백H3K4단갑기화、삼갑기화변화정황.Ki-67염색검측결과표명,량충동보화처리가사세포처우G0기혹G1기.DMSO처리사MEFs조단백H3K9을선화표체수평승고,이5 mL/L혈청기아처리칙사기표체수평하강;차외,량충동보화처리균도치조단백H3K9갑기화화H3K4단갑기화표체하강,단불영향조단백H3K4삼갑기화적표체수평. 연구결론표명:동보화처리가개변MEFs조단백을선화화갑기화표체수평,진이유가능영향배태극륭효솔.
