安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
17期
10153-10155
,共3页
Taq DNA聚合酶%热纯化%pET-32A%BL21(DE3)
Taq DNA聚閤酶%熱純化%pET-32A%BL21(DE3)
Taq DNA취합매%열순화%pET-32A%BL21(DE3)
[目的]提高Taq DNA聚合酶的制备效率.[方法]利用Ni柱亲和色谱纯化载有6xHis标记的Taq DNA聚合酶,并重组载体,利用Taq DNA聚合酶的耐热特性,对粗提液75℃处理1h,之后通过PCR试验验证制备酶液的活力.[结果]所获重组的pET-32A-Taq能够在BL21(DE3)宿主菌中高效表达并可通过热变性去除杂蛋白,获得了活力远高于购买的Taq DNA聚合酶的酶制剂.[结论]使用热纯化法制备的Taq DNA聚合酶工艺简单,成本较低,能满足常规大量PCR实验要求.
[目的]提高Taq DNA聚閤酶的製備效率.[方法]利用Ni柱親和色譜純化載有6xHis標記的Taq DNA聚閤酶,併重組載體,利用Taq DNA聚閤酶的耐熱特性,對粗提液75℃處理1h,之後通過PCR試驗驗證製備酶液的活力.[結果]所穫重組的pET-32A-Taq能夠在BL21(DE3)宿主菌中高效錶達併可通過熱變性去除雜蛋白,穫得瞭活力遠高于購買的Taq DNA聚閤酶的酶製劑.[結論]使用熱純化法製備的Taq DNA聚閤酶工藝簡單,成本較低,能滿足常規大量PCR實驗要求.
[목적]제고Taq DNA취합매적제비효솔.[방법]이용Ni주친화색보순화재유6xHis표기적Taq DNA취합매,병중조재체,이용Taq DNA취합매적내열특성,대조제액75℃처리1h,지후통과PCR시험험증제비매액적활력.[결과]소획중조적pET-32A-Taq능구재BL21(DE3)숙주균중고효표체병가통과열변성거제잡단백,획득료활력원고우구매적Taq DNA취합매적매제제.[결론]사용열순화법제비적Taq DNA취합매공예간단,성본교저,능만족상규대량PCR실험요구.
