解剖学杂志
解剖學雜誌
해부학잡지
CHINESE JOURNAL OF ANATOMY
2012年
2期
145-148,封2
,共5页
单伟%包翠芬%郑仕杰%刘雷%王岩%秦书俭
單偉%包翠芬%鄭仕傑%劉雷%王巖%秦書儉
단위%포취분%정사걸%류뢰%왕암%진서검
骨髓间充质干细胞%RNAi技术%T淋巴细胞%分泌功能%成骨能力
骨髓間充質榦細胞%RNAi技術%T淋巴細胞%分泌功能%成骨能力
골수간충질간세포%RNAi기술%T림파세포%분비공능%성골능력
目的:探讨应用RNAi技术沉默HLA-A2表达的人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)对人异体T淋巴细胞分泌功能的调节作用及诱导成骨能力的影响.方法:用siRNA转染至第3代hBMSCs将转染前、后各组的hBMSCs与PHA刺激的人异体T淋巴细胞共同培养,用ELISA检测各培养组上清液γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)的水平；对2组细胞进行成骨诱导分化培养,观察细胞形态变化；碱性磷酸酶染色、计数和Vor- Kossa染色、计数检测成骨能力.结果:hBMSCs表面抗原CD44、CD166阳性.转染前hBMSCs的HLA-A2表达为阳性,转染后hBMSCs的HLA-A2表达为弱阳性；转染前hBMSCs的HLA-A2蛋白表达量高于转染后的HLA-A2蛋白表达量.转染前、后的hBMBCs均能抑制人T淋巴细胞分泌IFN-γ、IL-2,转染前、后比较有差异.ALP染色显示转染前、后的hBMSCs均出现胞质呈棕黑色的阳性反应,ALP活性检测结果显示2组之间无差异.Vor-Kossa染色显示转染前、后的hBMSCs均有钙结节形成,统计2组之间无差异.结论:应用RNAi技术沉默HLA-A2表达的hBMSCs可以抑制PHA刺激人T淋巴细胞分泌因子IFN-γ、IL-2的水平,转染后的hBMSCs比未转染的hBMSCs抑制作用更强.应用RNAi技术沉默HLA-A2表达的hBMSCs,不影响其成骨能力.
目的:探討應用RNAi技術沉默HLA-A2錶達的人骨髓間充質榦細胞(hBMSCs)對人異體T淋巴細胞分泌功能的調節作用及誘導成骨能力的影響.方法:用siRNA轉染至第3代hBMSCs將轉染前、後各組的hBMSCs與PHA刺激的人異體T淋巴細胞共同培養,用ELISA檢測各培養組上清液γ榦擾素(IFN-γ)、白細胞介素2(IL-2)的水平；對2組細胞進行成骨誘導分化培養,觀察細胞形態變化；堿性燐痠酶染色、計數和Vor- Kossa染色、計數檢測成骨能力.結果:hBMSCs錶麵抗原CD44、CD166暘性.轉染前hBMSCs的HLA-A2錶達為暘性,轉染後hBMSCs的HLA-A2錶達為弱暘性；轉染前hBMSCs的HLA-A2蛋白錶達量高于轉染後的HLA-A2蛋白錶達量.轉染前、後的hBMBCs均能抑製人T淋巴細胞分泌IFN-γ、IL-2,轉染前、後比較有差異.ALP染色顯示轉染前、後的hBMSCs均齣現胞質呈棕黑色的暘性反應,ALP活性檢測結果顯示2組之間無差異.Vor-Kossa染色顯示轉染前、後的hBMSCs均有鈣結節形成,統計2組之間無差異.結論:應用RNAi技術沉默HLA-A2錶達的hBMSCs可以抑製PHA刺激人T淋巴細胞分泌因子IFN-γ、IL-2的水平,轉染後的hBMSCs比未轉染的hBMSCs抑製作用更彊.應用RNAi技術沉默HLA-A2錶達的hBMSCs,不影響其成骨能力.
목적:탐토응용RNAi기술침묵HLA-A2표체적인골수간충질간세포(hBMSCs)대인이체T림파세포분비공능적조절작용급유도성골능력적영향.방법:용siRNA전염지제3대hBMSCs장전염전、후각조적hBMSCs여PHA자격적인이체T림파세포공동배양,용ELISA검측각배양조상청액γ간우소(IFN-γ)、백세포개소2(IL-2)적수평；대2조세포진행성골유도분화배양,관찰세포형태변화；감성린산매염색、계수화Vor- Kossa염색、계수검측성골능력.결과:hBMSCs표면항원CD44、CD166양성.전염전hBMSCs적HLA-A2표체위양성,전염후hBMSCs적HLA-A2표체위약양성；전염전hBMSCs적HLA-A2단백표체량고우전염후적HLA-A2단백표체량.전염전、후적hBMBCs균능억제인T림파세포분비IFN-γ、IL-2,전염전、후비교유차이.ALP염색현시전염전、후적hBMSCs균출현포질정종흑색적양성반응,ALP활성검측결과현시2조지간무차이.Vor-Kossa염색현시전염전、후적hBMSCs균유개결절형성,통계2조지간무차이.결론:응용RNAi기술침묵HLA-A2표체적hBMSCs가이억제PHA자격인T림파세포분비인자IFN-γ、IL-2적수평,전염후적hBMSCs비미전염적hBMSCs억제작용경강.응용RNAi기술침묵HLA-A2표체적hBMSCs,불영향기성골능력.
