东北农业大学学报
東北農業大學學報
동북농업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
8期
1-5
,共5页
邵美丽%刘思国%赵燕丽%孔保华
邵美麗%劉思國%趙燕麗%孔保華
소미려%류사국%조연려%공보화
TaqMan探针%单增李斯特菌hlyA基因%肉%荧光定量PCR
TaqMan探針%單增李斯特菌hlyA基因%肉%熒光定量PCR
TaqMan탐침%단증리사특균hlyA기인%육%형광정량PCR
根据GenBank公布的单增李斯特菌的hlyA基因序列设计一对引物和一条TaqMan探,在分析特异性基础上,构建阳性重组质粒进行荧光定量PCR扩增,制备标准曲线,分析敏感度.进一步将该方法应用到人工染菌肉样中,分析其最低检出限.结果表明,该方法对10株单增李斯特菌均可产生特异性扩增曲线,其他6株非单增李斯特菌不产生扩增曲线,表明该方法具有较强的特异性.对阳性重组质粒定量扩增所建立标准曲线的相关系数为0.998,敏感度为19.5 copies· μL-1.该法对人工染菌肉样中单增李斯特菌的最低检出限为2.8×102cfu·g-1.该方法特异性强、敏感性高,可为肉中单增李斯特菌的快速、准确的定量检测奠定基础.
根據GenBank公佈的單增李斯特菌的hlyA基因序列設計一對引物和一條TaqMan探,在分析特異性基礎上,構建暘性重組質粒進行熒光定量PCR擴增,製備標準麯線,分析敏感度.進一步將該方法應用到人工染菌肉樣中,分析其最低檢齣限.結果錶明,該方法對10株單增李斯特菌均可產生特異性擴增麯線,其他6株非單增李斯特菌不產生擴增麯線,錶明該方法具有較彊的特異性.對暘性重組質粒定量擴增所建立標準麯線的相關繫數為0.998,敏感度為19.5 copies· μL-1.該法對人工染菌肉樣中單增李斯特菌的最低檢齣限為2.8×102cfu·g-1.該方法特異性彊、敏感性高,可為肉中單增李斯特菌的快速、準確的定量檢測奠定基礎.
근거GenBank공포적단증리사특균적hlyA기인서렬설계일대인물화일조TaqMan탐,재분석특이성기출상,구건양성중조질립진행형광정량PCR확증,제비표준곡선,분석민감도.진일보장해방법응용도인공염균육양중,분석기최저검출한.결과표명,해방법대10주단증리사특균균가산생특이성확증곡선,기타6주비단증리사특균불산생확증곡선,표명해방법구유교강적특이성.대양성중조질립정량확증소건립표준곡선적상관계수위0.998,민감도위19.5 copies· μL-1.해법대인공염균육양중단증리사특균적최저검출한위2.8×102cfu·g-1.해방법특이성강、민감성고,가위육중단증리사특균적쾌속、준학적정량검측전정기출.
