昆虫学报
昆蟲學報
곤충학보
ACTA ENTOMOLOGICA SINICA
2006年
5期
740-746
,共7页
蒋金炜%高素霞%安世恒%王琛柱
蔣金煒%高素霞%安世恆%王琛柱
장금위%고소하%안세항%왕침주
烟实夜蛾%化学感受蛋白%基因克隆%测序%原核表达
煙實夜蛾%化學感受蛋白%基因剋隆%測序%原覈錶達
연실야아%화학감수단백%기인극륭%측서%원핵표체
利用RT-PCR技术扩增了编码烟实夜蛾Helicoverpa assulta触角化学感受蛋白(chemosensory protein)的全长cDNA.克隆和测序结果表明,烟实夜蛾化学感受蛋白基因核苷酸序列全长384bp(GenBank序列号:DQ285667),编码127个氨基酸残基,预测N-末端包含16个氨基酸组成的信号肽序列,因此估测其成熟蛋白分子量为12.97kD,等电点为5.32.将该基因重组到表达载体pGEX-4T2中,并转入原核细胞中进行表达.SDS-PAGE和Westem印迹分析表明,经IPTG诱导后,烟实夜蛾化学感受蛋白基因能在大肠杆菌BL21中表达,电泳检测到一条约39 kD的外源蛋白,与预测的融合蛋白分子量大小相符.
利用RT-PCR技術擴增瞭編碼煙實夜蛾Helicoverpa assulta觸角化學感受蛋白(chemosensory protein)的全長cDNA.剋隆和測序結果錶明,煙實夜蛾化學感受蛋白基因覈苷痠序列全長384bp(GenBank序列號:DQ285667),編碼127箇氨基痠殘基,預測N-末耑包含16箇氨基痠組成的信號肽序列,因此估測其成熟蛋白分子量為12.97kD,等電點為5.32.將該基因重組到錶達載體pGEX-4T2中,併轉入原覈細胞中進行錶達.SDS-PAGE和Westem印跡分析錶明,經IPTG誘導後,煙實夜蛾化學感受蛋白基因能在大腸桿菌BL21中錶達,電泳檢測到一條約39 kD的外源蛋白,與預測的融閤蛋白分子量大小相符.
이용RT-PCR기술확증료편마연실야아Helicoverpa assulta촉각화학감수단백(chemosensory protein)적전장cDNA.극륭화측서결과표명,연실야아화학감수단백기인핵감산서렬전장384bp(GenBank서렬호:DQ285667),편마127개안기산잔기,예측N-말단포함16개안기산조성적신호태서렬,인차고측기성숙단백분자량위12.97kD,등전점위5.32.장해기인중조도표체재체pGEX-4T2중,병전입원핵세포중진행표체.SDS-PAGE화Westem인적분석표명,경IPTG유도후,연실야아화학감수단백기인능재대장간균BL21중표체,전영검측도일조약39 kD적외원단백,여예측적융합단백분자량대소상부.
