岭南现代临床外科
嶺南現代臨床外科
령남현대림상외과
LINGNAN MODERN CLINICS IN SURGERY
2011年
1期
13-16
,共4页
李旺林%曹杰%张伟健%杨平%陈熙文%王强%梁立源
李旺林%曹傑%張偉健%楊平%陳熙文%王彊%樑立源
리왕림%조걸%장위건%양평%진희문%왕강%량립원
KISS-1基因%结肠肿瘤%SW480细胞%侵袭%迁移
KISS-1基因%結腸腫瘤%SW480細胞%侵襲%遷移
KISS-1기인%결장종류%SW480세포%침습%천이
目的 探讨人肿瘤转移抑制基因KiSS-1对人结肠癌SW480细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响.方法 将携有KISS-1基因的重组真核表达质粒pRc/CMV2-KISS-1转化大肠杆菌DH5et并扩增,抽提纯化质粒并进行酶切鉴定,pRc/CMV2-KISS-1体外转染SW480细胞(SW480-FH1T),筛选稳定转染的细胞并扩增培养,以转染了空质粒pRc/CMV2的SW480细胞(SW480-pRc/CMV2)和正常SW480细胞为对照,用RT-PCR检测KISS-1的表达情况,并用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)和细胞侵袭实验和迁移实验分别检测KISS-1基因转染前、后SW480细胞增殖、侵袭和迁移活性的变化.结果 pRc/CMV2-KISS-1的酶切鉴定证实含有目的 基因KISS-1;SW480-KISS-1细胞的RT-PCR产物经凝胶电泳有明显的阳性条带,而对照组则无;MTT实验结果显示重组质粒转染组SW480细胞的增殖明显受到抑制;Transwell体外侵袭实验显示转染pRc/CMV2-KISS-1能明显抑制SW480细胞的体外侵袭力(P<0.01);体外迁移实验显示转染pRc/CMV2-KISS-1能明显抑制SW480细胞的体外迁移力(P<0.01).结论 KiSS-1基因能显著抑制人结肠癌SW480细胞的侵袭和迁移能力,在结肠肿瘤的转移中起重要作用.
目的 探討人腫瘤轉移抑製基因KiSS-1對人結腸癌SW480細胞增殖、侵襲、遷移能力的影響.方法 將攜有KISS-1基因的重組真覈錶達質粒pRc/CMV2-KISS-1轉化大腸桿菌DH5et併擴增,抽提純化質粒併進行酶切鑒定,pRc/CMV2-KISS-1體外轉染SW480細胞(SW480-FH1T),篩選穩定轉染的細胞併擴增培養,以轉染瞭空質粒pRc/CMV2的SW480細胞(SW480-pRc/CMV2)和正常SW480細胞為對照,用RT-PCR檢測KISS-1的錶達情況,併用四甲基偶氮唑藍比色法(MTT法)和細胞侵襲實驗和遷移實驗分彆檢測KISS-1基因轉染前、後SW480細胞增殖、侵襲和遷移活性的變化.結果 pRc/CMV2-KISS-1的酶切鑒定證實含有目的 基因KISS-1;SW480-KISS-1細胞的RT-PCR產物經凝膠電泳有明顯的暘性條帶,而對照組則無;MTT實驗結果顯示重組質粒轉染組SW480細胞的增殖明顯受到抑製;Transwell體外侵襲實驗顯示轉染pRc/CMV2-KISS-1能明顯抑製SW480細胞的體外侵襲力(P<0.01);體外遷移實驗顯示轉染pRc/CMV2-KISS-1能明顯抑製SW480細胞的體外遷移力(P<0.01).結論 KiSS-1基因能顯著抑製人結腸癌SW480細胞的侵襲和遷移能力,在結腸腫瘤的轉移中起重要作用.
목적 탐토인종류전이억제기인KiSS-1대인결장암SW480세포증식、침습、천이능력적영향.방법 장휴유KISS-1기인적중조진핵표체질립pRc/CMV2-KISS-1전화대장간균DH5et병확증,추제순화질립병진행매절감정,pRc/CMV2-KISS-1체외전염SW480세포(SW480-FH1T),사선은정전염적세포병확증배양,이전염료공질립pRc/CMV2적SW480세포(SW480-pRc/CMV2)화정상SW480세포위대조,용RT-PCR검측KISS-1적표체정황,병용사갑기우담서람비색법(MTT법)화세포침습실험화천이실험분별검측KISS-1기인전염전、후SW480세포증식、침습화천이활성적변화.결과 pRc/CMV2-KISS-1적매절감정증실함유목적 기인KISS-1;SW480-KISS-1세포적RT-PCR산물경응효전영유명현적양성조대,이대조조칙무;MTT실험결과현시중조질립전염조SW480세포적증식명현수도억제;Transwell체외침습실험현시전염pRc/CMV2-KISS-1능명현억제SW480세포적체외침습력(P<0.01);체외천이실험현시전염pRc/CMV2-KISS-1능명현억제SW480세포적체외천이력(P<0.01).결론 KiSS-1기인능현저억제인결장암SW480세포적침습화천이능력,재결장종류적전이중기중요작용.
