中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2011年
9期
1616-1618
,共3页
α-突触核蛋白%HPLC%帕金森病
α-突觸覈蛋白%HPLC%帕金森病
α-돌촉핵단백%HPLC%파금삼병
目的 构建α-突触核蛋白的原核表达系统,通过蛋白纯化的定量测定,确定表达这一蛋白的最合适载体和纯化方法,为进一步研究岶金森病病理机制奠定基础.方法 将含有α-突触核蛋白DNA序列的质粒pET3a-Syn和pCEX-4T-1-Syn分别转入BL21(DE3),IPTG(异丙基-D-硫代半乳糖苷)诱导表达,分别采用HPLC和亲和层析的方法进行纯化.纯化后的蛋白进行SDS-PAGE电泳检测纯度,BCA法进行定量比较.结果 构建了α-突触核蛋白两种载体的原核表达系统.pET3a-Syn表达的蛋白,每升菌液可获得20.5 mg目的蛋白;pGEX-Syn表达的蛋白,每升菌液可获得4.8 mg目的蛋白.结论 比较了两种α-突触核蛋白载体表达情况,确定了能够得到大量、高纯度α-突触核蛋白的纯化方法.
目的 構建α-突觸覈蛋白的原覈錶達繫統,通過蛋白純化的定量測定,確定錶達這一蛋白的最閤適載體和純化方法,為進一步研究岶金森病病理機製奠定基礎.方法 將含有α-突觸覈蛋白DNA序列的質粒pET3a-Syn和pCEX-4T-1-Syn分彆轉入BL21(DE3),IPTG(異丙基-D-硫代半乳糖苷)誘導錶達,分彆採用HPLC和親和層析的方法進行純化.純化後的蛋白進行SDS-PAGE電泳檢測純度,BCA法進行定量比較.結果 構建瞭α-突觸覈蛋白兩種載體的原覈錶達繫統.pET3a-Syn錶達的蛋白,每升菌液可穫得20.5 mg目的蛋白;pGEX-Syn錶達的蛋白,每升菌液可穫得4.8 mg目的蛋白.結論 比較瞭兩種α-突觸覈蛋白載體錶達情況,確定瞭能夠得到大量、高純度α-突觸覈蛋白的純化方法.
목적 구건α-돌촉핵단백적원핵표체계통,통과단백순화적정량측정,학정표체저일단백적최합괄재체화순화방법,위진일보연구백금삼병병리궤제전정기출.방법 장함유α-돌촉핵단백DNA서렬적질립pET3a-Syn화pCEX-4T-1-Syn분별전입BL21(DE3),IPTG(이병기-D-류대반유당감)유도표체,분별채용HPLC화친화층석적방법진행순화.순화후적단백진행SDS-PAGE전영검측순도,BCA법진행정량비교.결과 구건료α-돌촉핵단백량충재체적원핵표체계통.pET3a-Syn표체적단백,매승균액가획득20.5 mg목적단백;pGEX-Syn표체적단백,매승균액가획득4.8 mg목적단백.결론 비교료량충α-돌촉핵단백재체표체정황,학정료능구득도대량、고순도α-돌촉핵단백적순화방법.
