霍乱弧菌外膜蛋白W的原核表达及抗原性分析
곽란호균외막단백W적원핵표체급항원성분석
Expression of Vibrio cholerae outer membrane protein W and identification of its antigenicity
  • 万方数据
    军事医学 군사의학
    BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
    2011年 10期 746-748,753 ,共4页

    李建华%王忠田%何君%左庭婷%韩雪莲%李岩伟%朱虹%端青

    리건화%왕충전%하군%좌정정%한설련%리암위%주홍%단청

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    외막단백W%곽란호균%원핵표체%항원성
    目的 在大肠杆菌中表达霍乱弧菌种特异性外膜蛋白(Omp)W,纯化后制备检测用OmpW抗体.方法 采用PCR法以霍乱弧菌基因组为模板扩增ompW基因,插入表达载体pET-32a( + )的多克隆位点,构建重组表达质粒pET-32a-ompW;重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,筛选阳性重组菌株,经IPTG诱导获得目的 蛋白,纯化后免疫新西兰大耳白兔,制备OmpW的多克隆抗体并进行鉴定.结果 扩增得到ompW基因片段,并成功构建pET-32a-ompW原核表达系统,重组蛋白OmpW以包涵体形式高效表达;制备的OmpW抗体能与天然的O1群和O139群霍乱弧菌结合.结论 霍乱弧菌OmpW可由原核系统高效表达,免疫获得的抗体具有较好的效价,为进一步制备霍乱弧菌检测用抗体奠定基础.
    목적 재대장간균중표체곽란호균충특이성외막단백(Omp)W,순화후제비검측용OmpW항체.방법 채용PCR법이곽란호균기인조위모판확증ompW기인,삽입표체재체pET-32a( + )적다극륭위점,구건중조표체질립pET-32a-ompW;중조질립전화지대장간균BL21(DE3)중,사선양성중조균주,경IPTG유도획득목적 단백,순화후면역신서란대이백토,제비OmpW적다극륭항체병진행감정.결과 확증득도ompW기인편단,병성공구건pET-32a-ompW원핵표체계통,중조단백OmpW이포함체형식고효표체;제비적OmpW항체능여천연적O1군화O139군곽란호균결합.결론 곽란호균OmpW가유원핵계통고효표체,면역획득적항체구유교호적효개,위진일보제비곽란호균검측용항체전정기출.
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