山地农业生物学报
山地農業生物學報
산지농업생물학보
JOURNAL OF MOUNTAIN AGRICULTURE AND BIOLOGY
2011年
3期
211-214
,共4页
张玉晶%李牡丹%石旭%关萍
張玉晶%李牡丹%石旭%關萍
장옥정%리모단%석욱%관평
珙桐%ISSR-PCR%正交试验%优化
珙桐%ISSR-PCR%正交試驗%優化
공동%ISSR-PCR%정교시험%우화
采用改良的CTAB法提取珙桐基因组DNA,并采用正交试验设计方法优化其ISSR-PCR反应体系.结果表明:改良CTAB法提取基因组DNA的质量符合ISSR-PCR扩增反应的要求.最佳反应体系为:20μL反应液中含有2.0μL10×buffer、2.75 mmol/L Mg2+、0.125 mmol/L dNTPs、0.7μmol/L引物、0.75 U Taq酶和40 ng模板；PCR反应参数为:94℃5 main；94℃30 s,53.2℃45 s,72℃1min,共40个循环；72℃7min.
採用改良的CTAB法提取珙桐基因組DNA,併採用正交試驗設計方法優化其ISSR-PCR反應體繫.結果錶明:改良CTAB法提取基因組DNA的質量符閤ISSR-PCR擴增反應的要求.最佳反應體繫為:20μL反應液中含有2.0μL10×buffer、2.75 mmol/L Mg2+、0.125 mmol/L dNTPs、0.7μmol/L引物、0.75 U Taq酶和40 ng模闆；PCR反應參數為:94℃5 main；94℃30 s,53.2℃45 s,72℃1min,共40箇循環；72℃7min.
채용개량적CTAB법제취공동기인조DNA,병채용정교시험설계방법우화기ISSR-PCR반응체계.결과표명:개량CTAB법제취기인조DNA적질량부합ISSR-PCR확증반응적요구.최가반응체계위:20μL반응액중함유2.0μL10×buffer、2.75 mmol/L Mg2+、0.125 mmol/L dNTPs、0.7μmol/L인물、0.75 U Taq매화40 ng모판；PCR반응삼수위:94℃5 main；94℃30 s,53.2℃45 s,72℃1min,공40개순배；72℃7min.
