CAJ | 학술논문

目的:探讨半胱-天冬氨酸蛋白酶8(Caspase 8)和死亡受体(DR)在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导神经母细胞瘤(NB)细胞凋亡中的作用.方法:应用RT-PCR方法检测γ干扰素(IFN-γ)作用前后NB细胞Caspase 8 mRNA的表达;应用Western blot 方法检测Caspase 8、DR4 和DR5 蛋白表达;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及流式细胞术检测IFN-γ,TRAIL,IFN-γ +TRAIL,Caspase 8 抑制剂+ TRAIL 及IFN-γ+阿霉素/依托泊苷+TRAIL对NB细胞株生长及凋亡的影响.结果:IFN-γ在NB细胞株SKNDZ中诱导了Caspase 8 mRNA及蛋白表达.SY5Y细胞对TRAIL不敏感,而IFN-γ与TRAIL或阿霉素/依托泊苷联用对SY5Y细胞有明显诱导凋亡作用.IFN-γ+TRAIL组SY5Y细胞早期凋亡率(23.09±2.35)%高于TRAIL 组[(6.15±0.54)%(P<0.01)],但低于IFN-γ+阿霉素/依托泊苷+TRAIL 组[(43.41±6.46)%/(38.86±7.29)%,P<0.01].阿霉素或依托泊苷可以诱导NB细胞株DR5蛋白表达,但未诱导DR4蛋白表达.IFNγ诱导后表达Caspase 8的SKNDZ细胞对TRAIL的诱导凋亡作用仍不敏感,而阿霉素或依托泊苷处理后同时表达DR5的SKNDZ细胞对TRAIL的诱导凋亡作用相对敏感.IFN-γ+阿霉素/依托泊苷+TRAIL组SKNDZ细胞早期凋亡率(11.54±2.49)%/(13.38±1.65)%高于IFN-γ+TRAIL 组(P<0.01).结论:IFN-γ上调Caspase 8表达及化疗药阿霉素或依托泊苷诱导DR5表达可以恢复NB细胞对TRAIL的敏感性,Caspase 8和DR5在TRAIL诱导NB细胞凋亡中起着十分关键的作用.
목적:탐토반광-천동안산단백매8(Caspase 8)화사망수체(DR)재종류배사인자상관조망유도배체(TRAIL)유도신경모세포류(NB)세포조망중적작용.방법:응용RT-PCR방법검측γ간우소(IFN-γ)작용전후NB세포Caspase 8 mRNA적표체;응용Western blot 방법검측Caspase 8、DR4 화DR5 단백표체;응용사갑기우담서람(MTT)비색법급류식세포술검측IFN-γ,TRAIL,IFN-γ +TRAIL,Caspase 8 억제제+ TRAIL 급IFN-γ+아매소/의탁박감+TRAIL대NB세포주생장급조망적영향.결과:IFN-γ재NB세포주SKNDZ중유도료Caspase 8 mRNA급단백표체.SY5Y세포대TRAIL불민감,이IFN-γ여TRAIL혹아매소/의탁박감련용대SY5Y세포유명현유도조망작용.IFN-γ+TRAIL조SY5Y세포조기조망솔(23.09±2.35)%고우TRAIL 조[(6.15±0.54)%(P<0.01)],단저우IFN-γ+아매소/의탁박감+TRAIL 조[(43.41±6.46)%/(38.86±7.29)%,P<0.01].아매소혹의탁박감가이유도NB세포주DR5단백표체,단미유도DR4단백표체.IFNγ유도후표체Caspase 8적SKNDZ세포대TRAIL적유도조망작용잉불민감,이아매소혹의탁박감처리후동시표체DR5적SKNDZ세포대TRAIL적유도조망작용상대민감.IFN-γ+아매소/의탁박감+TRAIL조SKNDZ세포조기조망솔(11.54±2.49)%/(13.38±1.65)%고우IFN-γ+TRAIL 조(P<0.01).결론:IFN-γ상조Caspase 8표체급화료약아매소혹의탁박감유도DR5표체가이회복NB세포대TRAIL적민감성,Caspase 8화DR5재TRAIL유도NB세포조망중기착십분관건적작용.