基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2012年
10期
1118-1125
,共8页
林庆玲%蔡彦宁%袁艳鹏%左晓虹
林慶玲%蔡彥寧%袁豔鵬%左曉虹
림경령%채언저%원염붕%좌효홍
时钟基因%启动子%甲基化特异性PCR
時鐘基因%啟動子%甲基化特異性PCR
시종기인%계동자%갑기화특이성PCR
目的 应用一种简单快速经济的方法检测8个主要时钟基因PER1、PER2、CRY1、CRY2、CLOCK、NPAS2、BMAL1和BMAL2启动子区甲基化状态,检测小鼠外周组织肝、心、肾、胸腺、睾丸时钟基因启动子区甲基化状态.方法 用偏重亚硫酸氢钠和对苯二酚对基因组DNA进行修饰.修饰后的DNA为模板,两套不同的引物对:甲基化特异性引物对和非甲基化特异性引物对扩增小鼠肝、心、肾、胸腺、睾丸组织时钟基因启动子区.PCR产物进行电泳和测序.结果 扩增产物与预期片段大小相符合.PCR产物经过直接测序进一步证实小鼠外周组织时钟基因启动子区均为非甲基化状态.结论 建立了一种检测小鼠时钟基因启动子区甲基化的新方法,借此证明成年小鼠5个外周组织8个时钟基因启动子区均呈非甲基化状态.
目的 應用一種簡單快速經濟的方法檢測8箇主要時鐘基因PER1、PER2、CRY1、CRY2、CLOCK、NPAS2、BMAL1和BMAL2啟動子區甲基化狀態,檢測小鼠外週組織肝、心、腎、胸腺、睪汍時鐘基因啟動子區甲基化狀態.方法 用偏重亞硫痠氫鈉和對苯二酚對基因組DNA進行脩飾.脩飾後的DNA為模闆,兩套不同的引物對:甲基化特異性引物對和非甲基化特異性引物對擴增小鼠肝、心、腎、胸腺、睪汍組織時鐘基因啟動子區.PCR產物進行電泳和測序.結果 擴增產物與預期片段大小相符閤.PCR產物經過直接測序進一步證實小鼠外週組織時鐘基因啟動子區均為非甲基化狀態.結論 建立瞭一種檢測小鼠時鐘基因啟動子區甲基化的新方法,藉此證明成年小鼠5箇外週組織8箇時鐘基因啟動子區均呈非甲基化狀態.
목적 응용일충간단쾌속경제적방법검측8개주요시종기인PER1、PER2、CRY1、CRY2、CLOCK、NPAS2、BMAL1화BMAL2계동자구갑기화상태,검측소서외주조직간、심、신、흉선、고환시종기인계동자구갑기화상태.방법 용편중아류산경납화대분이분대기인조DNA진행수식.수식후적DNA위모판,량투불동적인물대:갑기화특이성인물대화비갑기화특이성인물대확증소서간、심、신、흉선、고환조직시종기인계동자구.PCR산물진행전영화측서.결과 확증산물여예기편단대소상부합.PCR산물경과직접측서진일보증실소서외주조직시종기인계동자구균위비갑기화상태.결론 건립료일충검측소서시종기인계동자구갑기화적신방법,차차증명성년소서5개외주조직8개시종기인계동자구균정비갑기화상태.
