昆明医学院学报
昆明醫學院學報
곤명의학원학보
ACADEMIC JOURNAL OF KUNMING MEDICAL COLLEGE
2012年
7期
11-14
,共4页
何颖红%赵文珍%杨勇琴%王一心
何穎紅%趙文珍%楊勇琴%王一心
하영홍%조문진%양용금%왕일심
IRF4%逆转录病毒载体%小鼠
IRF4%逆轉錄病毒載體%小鼠
IRF4%역전록병독재체%소서
目的 将小鼠IRF4基因定向克隆入MSCV-IRES-GFP质粒,得到长期稳定表达IRF4的逆转录病毒载体.方法 以含IRF4cDNA质粒作为模板,PCR扩增所需目的片段；将该片段连接入MSCV-IRES-GFP质粒；以磷酸钙法转染293T细胞,收集病毒上清感染GP+E86细胞后,流式细胞术和蛋白印迹技术检测IRF4的表达.结果 经琼脂糖凝胶电泳鉴定,目的片段成功连接到逆转录病毒MSCV载体上.逆转录病毒上清成功感染GP+E86细胞系.结论 成功构建了小鼠IRF4逆转录病毒表达载体,并实现了IRF4在GP+E86细胞系中的外源性表达.
目的 將小鼠IRF4基因定嚮剋隆入MSCV-IRES-GFP質粒,得到長期穩定錶達IRF4的逆轉錄病毒載體.方法 以含IRF4cDNA質粒作為模闆,PCR擴增所需目的片段；將該片段連接入MSCV-IRES-GFP質粒；以燐痠鈣法轉染293T細胞,收集病毒上清感染GP+E86細胞後,流式細胞術和蛋白印跡技術檢測IRF4的錶達.結果 經瓊脂糖凝膠電泳鑒定,目的片段成功連接到逆轉錄病毒MSCV載體上.逆轉錄病毒上清成功感染GP+E86細胞繫.結論 成功構建瞭小鼠IRF4逆轉錄病毒錶達載體,併實現瞭IRF4在GP+E86細胞繫中的外源性錶達.
목적 장소서IRF4기인정향극륭입MSCV-IRES-GFP질립,득도장기은정표체IRF4적역전록병독재체.방법 이함IRF4cDNA질립작위모판,PCR확증소수목적편단；장해편단련접입MSCV-IRES-GFP질립；이린산개법전염293T세포,수집병독상청감염GP+E86세포후,류식세포술화단백인적기술검측IRF4적표체.결과 경경지당응효전영감정,목적편단성공련접도역전록병독MSCV재체상.역전록병독상청성공감염GP+E86세포계.결론 성공구건료소서IRF4역전록병독표체재체,병실현료IRF4재GP+E86세포계중적외원성표체.
