世界华人消化杂志
世界華人消化雜誌
세계화인소화잡지
WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
2002年
10期
1162-1165
,共4页
李晓鲁%彭毅志%袁志强%太光平%陈渝
李曉魯%彭毅誌%袁誌彊%太光平%陳渝
리효로%팽의지%원지강%태광평%진투
目的:构建并鉴定含人全长热休克蛋白72(HSP72)基因的重组腺病毒,为严重创伤后缺血缺氧损伤的防治提供基因治疗措施.方法:用同源重组方法构建含人全长HSP72目的基因的复制缺陷型腺病毒载体(AdCMV-HSP72),并加以鉴定、扩增,以制取高滴度AdCMV-HSP72转染液,体外转染肠上皮细胞株IEC-6,检测目的基因表达.结果:将构建的重组腺病毒载体AdCMV-HSP72转染肠上皮细胞并表达48 h后,RT-PCR检测转染组显示特异性扩增的532bpHSP72目的基因片段.对照组(转染空腺病毒载体组)扩增结果为阴性.蛋白印迹结果显示AdCMV-HSP72转染组HSP72蛋白的表达明显增高.结论:腺病毒载体可较高效率介导HSP72在肠上皮细胞的表达.所获AdCMV-HSP72重组腺病毒可进一步用于基因治疗研究.
目的:構建併鑒定含人全長熱休剋蛋白72(HSP72)基因的重組腺病毒,為嚴重創傷後缺血缺氧損傷的防治提供基因治療措施.方法:用同源重組方法構建含人全長HSP72目的基因的複製缺陷型腺病毒載體(AdCMV-HSP72),併加以鑒定、擴增,以製取高滴度AdCMV-HSP72轉染液,體外轉染腸上皮細胞株IEC-6,檢測目的基因錶達.結果:將構建的重組腺病毒載體AdCMV-HSP72轉染腸上皮細胞併錶達48 h後,RT-PCR檢測轉染組顯示特異性擴增的532bpHSP72目的基因片段.對照組(轉染空腺病毒載體組)擴增結果為陰性.蛋白印跡結果顯示AdCMV-HSP72轉染組HSP72蛋白的錶達明顯增高.結論:腺病毒載體可較高效率介導HSP72在腸上皮細胞的錶達.所穫AdCMV-HSP72重組腺病毒可進一步用于基因治療研究.
목적:구건병감정함인전장열휴극단백72(HSP72)기인적중조선병독,위엄중창상후결혈결양손상적방치제공기인치료조시.방법:용동원중조방법구건함인전장HSP72목적기인적복제결함형선병독재체(AdCMV-HSP72),병가이감정、확증,이제취고적도AdCMV-HSP72전염액,체외전염장상피세포주IEC-6,검측목적기인표체.결과:장구건적중조선병독재체AdCMV-HSP72전염장상피세포병표체48 h후,RT-PCR검측전염조현시특이성확증적532bpHSP72목적기인편단.대조조(전염공선병독재체조)확증결과위음성.단백인적결과현시AdCMV-HSP72전염조HSP72단백적표체명현증고.결론:선병독재체가교고효솔개도HSP72재장상피세포적표체.소획AdCMV-HSP72중조선병독가진일보용우기인치료연구.
