中国农业科学
中國農業科學
중국농업과학
SCIENTIA AGRICULTURA SINICA
2007年
3期
457-463
,共7页
李巧云%安学丽%肖英华%张倩%张艳贞%夏先春%何中虎%晏月明
李巧雲%安學麗%肖英華%張倩%張豔貞%夏先春%何中虎%晏月明
리교운%안학려%초영화%장천%장염정%하선춘%하중호%안월명
野生二粒小麦%LMW-GS%AS-PCR%基因克隆
野生二粒小麥%LMW-GS%AS-PCR%基因剋隆
야생이립소맥%LMW-GS%AS-PCR%기인극륭
[目的]旨在从野生二粒小麦中克隆新的低分子量谷蛋白亚基基因.[方法]首先通过SDS-PAGE方法对野生二粒小麦Y5和Y13的低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)进行鉴定,并利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)方法确定其精确分子量.然后采用AS-PCR方法,运用1对LMW-GS特异的引物,分别从Y5和Y13中扩增并克隆了2个亚基的编码基因(命名为LMW-Y5和LMW-Y13).[结果]测序结果表明,所得基因均为完整的基因序列,包括上游区域、开放阅读框和下游区域,无内含子存在.由核酸序列所推导出的氨基酸序列表明,这两个基因的编码蛋白(命名为LMW-Y5和LMW-Y13)均属于LMW-i型亚基,分子量分别为38.9122 kD和31.8708 kD.其中LMW-Y5的分子量与质谱鉴定的分子量基本一致,表明该蛋白亚基没有翻译后修饰存在.但LMW-Y13的分子量与SDS-PAGE和质谱鉴定结果存在较大差异,其原因可能是在克隆过程中发生了重复区的碱基丢失.[结论]明确了野生二粒小麦两个LMW-i型亚基的分子结构特征,并讨论了LMW-i型亚基分子结构与品质的关系以及在小麦品质改良中的应用潜力.
[目的]旨在從野生二粒小麥中剋隆新的低分子量穀蛋白亞基基因.[方法]首先通過SDS-PAGE方法對野生二粒小麥Y5和Y13的低分子量穀蛋白亞基(LMW-GS)進行鑒定,併利用基質輔助激光解析電離飛行時間質譜(MALDI-TOF-MS)方法確定其精確分子量.然後採用AS-PCR方法,運用1對LMW-GS特異的引物,分彆從Y5和Y13中擴增併剋隆瞭2箇亞基的編碼基因(命名為LMW-Y5和LMW-Y13).[結果]測序結果錶明,所得基因均為完整的基因序列,包括上遊區域、開放閱讀框和下遊區域,無內含子存在.由覈痠序列所推導齣的氨基痠序列錶明,這兩箇基因的編碼蛋白(命名為LMW-Y5和LMW-Y13)均屬于LMW-i型亞基,分子量分彆為38.9122 kD和31.8708 kD.其中LMW-Y5的分子量與質譜鑒定的分子量基本一緻,錶明該蛋白亞基沒有翻譯後脩飾存在.但LMW-Y13的分子量與SDS-PAGE和質譜鑒定結果存在較大差異,其原因可能是在剋隆過程中髮生瞭重複區的堿基丟失.[結論]明確瞭野生二粒小麥兩箇LMW-i型亞基的分子結構特徵,併討論瞭LMW-i型亞基分子結構與品質的關繫以及在小麥品質改良中的應用潛力.
[목적]지재종야생이립소맥중극륭신적저분자량곡단백아기기인.[방법]수선통과SDS-PAGE방법대야생이립소맥Y5화Y13적저분자량곡단백아기(LMW-GS)진행감정,병이용기질보조격광해석전리비행시간질보(MALDI-TOF-MS)방법학정기정학분자량.연후채용AS-PCR방법,운용1대LMW-GS특이적인물,분별종Y5화Y13중확증병극륭료2개아기적편마기인(명명위LMW-Y5화LMW-Y13).[결과]측서결과표명,소득기인균위완정적기인서렬,포괄상유구역、개방열독광화하유구역,무내함자존재.유핵산서렬소추도출적안기산서렬표명,저량개기인적편마단백(명명위LMW-Y5화LMW-Y13)균속우LMW-i형아기,분자량분별위38.9122 kD화31.8708 kD.기중LMW-Y5적분자량여질보감정적분자량기본일치,표명해단백아기몰유번역후수식존재.단LMW-Y13적분자량여SDS-PAGE화질보감정결과존재교대차이,기원인가능시재극륭과정중발생료중복구적감기주실.[결론]명학료야생이립소맥량개LMW-i형아기적분자결구특정,병토론료LMW-i형아기분자결구여품질적관계이급재소맥품질개량중적응용잠력.
