河南科学
河南科學
하남과학
HENAN SCIENCE
2009年
6期
670-674
,共5页
张永晶%谢来峰%王磊%樊晋宇%徐存拴
張永晶%謝來峰%王磊%樊晉宇%徐存拴
장영정%사래봉%왕뢰%번진우%서존전
大鼠%细胞分离和鉴定%肝星形细胞%免疫磁珠%标记蛋白
大鼠%細胞分離和鑒定%肝星形細胞%免疫磁珠%標記蛋白
대서%세포분리화감정%간성형세포%면역자주%표기단백
按Higgins等方法制作大鼠2,3肝切除(parital hepatectomy,PH)模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,用60%Percoll梯度离心和免疫磁珠相结合分离肝星形细胞,用结蛋白(desmin,DES)和波形蛋白(vimentin,VIM)的免疫组织化学定性、定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝脏细胞及分离的肝星形细胞,用RT-PCR定量肝星形细胞的DES和VIM mRNA,用蛋白免疫印迹定量肝星形细胞DES和VIM.初步证实,分离的肝星形细胞中DES和VIM阳性细胞占95%以上,从PH后各时间点分离的肝星形细胞的DES和VIM mRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定.表明改进的分离肝星形细胞方法具有收率和纯度高、活性好等特点,值得采用.
按Higgins等方法製作大鼠2,3肝切除(parital hepatectomy,PH)模型,用兩步灌流法分散肝髒細胞,用60%Percoll梯度離心和免疫磁珠相結閤分離肝星形細胞,用結蛋白(desmin,DES)和波形蛋白(vimentin,VIM)的免疫組織化學定性、定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝髒細胞及分離的肝星形細胞,用RT-PCR定量肝星形細胞的DES和VIM mRNA,用蛋白免疫印跡定量肝星形細胞DES和VIM.初步證實,分離的肝星形細胞中DES和VIM暘性細胞佔95%以上,從PH後各時間點分離的肝星形細胞的DES和VIM mRNA量穩定,相應的蛋白量亦穩定.錶明改進的分離肝星形細胞方法具有收率和純度高、活性好等特點,值得採用.
안Higgins등방법제작대서2,3간절제(parital hepatectomy,PH)모형,용량보관류법분산간장세포,용60%Percoll제도리심화면역자주상결합분리간성형세포,용결단백(desmin,DES)화파형단백(vimentin,VIM)적면역조직화학정성、정위재생간(regenerating liver,RL)、분산적간장세포급분리적간성형세포,용RT-PCR정량간성형세포적DES화VIM mRNA,용단백면역인적정량간성형세포DES화VIM.초보증실,분리적간성형세포중DES화VIM양성세포점95%이상,종PH후각시간점분리적간성형세포적DES화VIM mRNA량은정,상응적단백량역은정.표명개진적분리간성형세포방법구유수솔화순도고、활성호등특점,치득채용.
