实用医药杂志
實用醫藥雜誌
실용의약잡지
Practical Journal of Medicine & Pharmacy
2010年
9期
828-829,832
,共3页
张立营%赵怀龙%马凤龙%傅兴伦%孙英姿%高波
張立營%趙懷龍%馬鳳龍%傅興倫%孫英姿%高波
장립영%조부룡%마봉룡%부흥륜%손영자%고파
相思子毒素%单克隆抗体%制备
相思子毒素%單剋隆抗體%製備
상사자독소%단극륭항체%제비
目的 制备相思子毒素单克隆抗体并鉴定其特性.方法 以甲醛处理的相思子毒素毒蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠;取免疫小鼠的脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA法筛选、融合细胞有限稀释法克隆、克隆化杂交瘤细胞株的亚类鉴定等方法筛选出单克隆抗体杂交瘤细胞株,用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,应用蛋白A亲和层析法进行单抗的纯化,并对单克隆抗体的特异性进行鉴定.结果 获得了4株可稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞2D3、4E6、1C8和1E5,诱生的腹水效价分别为1∶1×107、1∶1×106、1∶1×105、1∶1×106,亚类鉴定表明2D3为IgG1,其余3株均为IgG2b;特异性鉴定显示它们与多种毒素均无交叉反应,经过亲和层析,获得了纯化的单抗.结论 获得了特异性的相思子毒素单克隆抗体,为建立相思子毒索的检测及纯化方法奠定了基础,其中4E6的效价最高,可作为检测相思子毒素的核心试剂.
目的 製備相思子毒素單剋隆抗體併鑒定其特性.方法 以甲醛處理的相思子毒素毒蛋白為抗原免疫BALB/c小鼠;取免疫小鼠的脾細胞與Sp2/0骨髓瘤細胞融閤,經間接ELISA法篩選、融閤細胞有限稀釋法剋隆、剋隆化雜交瘤細胞株的亞類鑒定等方法篩選齣單剋隆抗體雜交瘤細胞株,用雜交瘤細胞株誘生小鼠腹水,應用蛋白A親和層析法進行單抗的純化,併對單剋隆抗體的特異性進行鑒定.結果 穫得瞭4株可穩定分泌單剋隆抗體的雜交瘤細胞2D3、4E6、1C8和1E5,誘生的腹水效價分彆為1∶1×107、1∶1×106、1∶1×105、1∶1×106,亞類鑒定錶明2D3為IgG1,其餘3株均為IgG2b;特異性鑒定顯示它們與多種毒素均無交扠反應,經過親和層析,穫得瞭純化的單抗.結論 穫得瞭特異性的相思子毒素單剋隆抗體,為建立相思子毒索的檢測及純化方法奠定瞭基礎,其中4E6的效價最高,可作為檢測相思子毒素的覈心試劑.
목적 제비상사자독소단극륭항체병감정기특성.방법 이갑철처리적상사자독소독단백위항원면역BALB/c소서;취면역소서적비세포여Sp2/0골수류세포융합,경간접ELISA법사선、융합세포유한희석법극륭、극륭화잡교류세포주적아류감정등방법사선출단극륭항체잡교류세포주,용잡교류세포주유생소서복수,응용단백A친화층석법진행단항적순화,병대단극륭항체적특이성진행감정.결과 획득료4주가은정분비단극륭항체적잡교류세포2D3、4E6、1C8화1E5,유생적복수효개분별위1∶1×107、1∶1×106、1∶1×105、1∶1×106,아류감정표명2D3위IgG1,기여3주균위IgG2b;특이성감정현시타문여다충독소균무교차반응,경과친화층석,획득료순화적단항.결론 획득료특이성적상사자독소단극륭항체,위건립상사자독색적검측급순화방법전정료기출,기중4E6적효개최고,가작위검측상사자독소적핵심시제.
