湖南师范大学自然科学学报
湖南師範大學自然科學學報
호남사범대학자연과학학보
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NORMALIS HUNANENSIS
2012年
2期
67-70
,共4页
赵碧峰%唐雄卓%李发祥%肖丽娜%杨荣%江志钢%吴秀山%王跃群
趙碧峰%唐雄卓%李髮祥%肖麗娜%楊榮%江誌鋼%吳秀山%王躍群
조벽봉%당웅탁%리발상%초려나%양영%강지강%오수산%왕약군
Pericardin%果蝇%原核表达%多克隆抗体
Pericardin%果蠅%原覈錶達%多剋隆抗體
Pericardin%과승%원핵표체%다극륭항체
Pericardin 基因是果蝇心脏发育的标记基因,在果蝇心脏发育过程中起着重要的作用.从果蝇体内提取出总RNA,反转录得到果蝇的cDNA,将其作为模板.通过生物信息学分析,选择Pericardin 基因抗原亲水区,选取特异性高的片段.将PCR片段克隆到原核表达pET28a(+)载体上,转入E.coli后通过IPTG(Isopropyl β-D-thiogal actoside)诱导表达His融合蛋白,蛋白经分离纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.经Western Blot 检测抗体的效价和特异性.结果显示,获得了Pericardin原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗Pericardin 多克隆抗体,为Pericardin 功能的进一步研究奠定了基础.
Pericardin 基因是果蠅心髒髮育的標記基因,在果蠅心髒髮育過程中起著重要的作用.從果蠅體內提取齣總RNA,反轉錄得到果蠅的cDNA,將其作為模闆.通過生物信息學分析,選擇Pericardin 基因抗原親水區,選取特異性高的片段.將PCR片段剋隆到原覈錶達pET28a(+)載體上,轉入E.coli後通過IPTG(Isopropyl β-D-thiogal actoside)誘導錶達His融閤蛋白,蛋白經分離純化後免疫新西蘭大白兔製備多剋隆抗體.經Western Blot 檢測抗體的效價和特異性.結果顯示,穫得瞭Pericardin原覈錶達重組融閤蛋白及高效價的特異性兔抗Pericardin 多剋隆抗體,為Pericardin 功能的進一步研究奠定瞭基礎.
Pericardin 기인시과승심장발육적표기기인,재과승심장발육과정중기착중요적작용.종과승체내제취출총RNA,반전록득도과승적cDNA,장기작위모판.통과생물신식학분석,선택Pericardin 기인항원친수구,선취특이성고적편단.장PCR편단극륭도원핵표체pET28a(+)재체상,전입E.coli후통과IPTG(Isopropyl β-D-thiogal actoside)유도표체His융합단백,단백경분리순화후면역신서란대백토제비다극륭항체.경Western Blot 검측항체적효개화특이성.결과현시,획득료Pericardin원핵표체중조융합단백급고효개적특이성토항Pericardin 다극륭항체,위Pericardin 공능적진일보연구전정료기출.
