海南医学
海南醫學
해남의학
HAINAN MEDICAL JOURNAL
2012年
16期
1-3
,共3页
MCF-7%MnSOD%Val16Ala%真核表达载体
MCF-7%MnSOD%Val16Ala%真覈錶達載體
MCF-7%MnSOD%Val16Ala%진핵표체재체
目的 获得锰超氧化物歧化酶(MnSOD)基因并进行Val16Ala (GTT→GCT)位点的定点突变,构建MnSOD (Val)及MnSOD (Ala)基因的真核表达载体.方法 采用RT-PCR法从人乳腺癌细胞MCF-7中扩增MnSOD(Val)基因；PCR引物延伸法对Val16Ala进行定点突变以获得MnSOD(Ala)基因；通过EcoR Ⅰ +Xho Ⅰ双酶切PCR产物与相应质粒pEGFP-N1连接构建两基因的真核表达载体pEGFP-N1-MnSOD(Val)和pEGFP-N1-MnSOD(Ala).结果 突变位点经测序证明正确,重组质粒经双酶切及测序鉴定证明正确.结论 本实验成功获得了MnSOD(Val)及MnSOD(Ala)基因并成功构建了两基因的真核表达载体.
目的 穫得錳超氧化物歧化酶(MnSOD)基因併進行Val16Ala (GTT→GCT)位點的定點突變,構建MnSOD (Val)及MnSOD (Ala)基因的真覈錶達載體.方法 採用RT-PCR法從人乳腺癌細胞MCF-7中擴增MnSOD(Val)基因；PCR引物延伸法對Val16Ala進行定點突變以穫得MnSOD(Ala)基因；通過EcoR Ⅰ +Xho Ⅰ雙酶切PCR產物與相應質粒pEGFP-N1連接構建兩基因的真覈錶達載體pEGFP-N1-MnSOD(Val)和pEGFP-N1-MnSOD(Ala).結果 突變位點經測序證明正確,重組質粒經雙酶切及測序鑒定證明正確.結論 本實驗成功穫得瞭MnSOD(Val)及MnSOD(Ala)基因併成功構建瞭兩基因的真覈錶達載體.
목적 획득맹초양화물기화매(MnSOD)기인병진행Val16Ala (GTT→GCT)위점적정점돌변,구건MnSOD (Val)급MnSOD (Ala)기인적진핵표체재체.방법 채용RT-PCR법종인유선암세포MCF-7중확증MnSOD(Val)기인；PCR인물연신법대Val16Ala진행정점돌변이획득MnSOD(Ala)기인；통과EcoR Ⅰ +Xho Ⅰ쌍매절PCR산물여상응질립pEGFP-N1련접구건량기인적진핵표체재체pEGFP-N1-MnSOD(Val)화pEGFP-N1-MnSOD(Ala).결과 돌변위점경측서증명정학,중조질립경쌍매절급측서감정증명정학.결론 본실험성공획득료MnSOD(Val)급MnSOD(Ala)기인병성공구건료량기인적진핵표체재체.
