中华神经外科疾病研究杂志
中華神經外科疾病研究雜誌
중화신경외과질병연구잡지
CHINESE JOURNAL OF NEUROSURGICAL DISEASE RESEARCH
2004年
1期
56-60
,共5页
娄晓辉%张亚卓%历俊华%杨瑞疆%余一俊
婁曉輝%張亞卓%歷俊華%楊瑞疆%餘一俊
루효휘%장아탁%력준화%양서강%여일준
骨髓基质细胞%神经细胞%分化
骨髓基質細胞%神經細胞%分化
골수기질세포%신경세포%분화
目的研究骨髓基质细胞在含血清培养基中向神经细胞分化的潜能.方法从健康人肋骨分离原代骨髓基质细胞,接种于含10%胎牛血清(FBS)的DMEM中,分为A组(3~4 d换液一次)、B组(不换液),在相差显微镜下观察生长情况.在培养的1,5,10 d用免疫荧光法检测两组骨髓基质细胞的各种表面标志物巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、微管相关蛋白(MAP-2)、S-100表达情况.并在培养的第1,4,7,10,13 d用酶联免疫吸附法(ELISA)检测 B组培养细胞上清中的脑源性神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)的分泌水平.结果 A组细胞分裂繁殖速度明显高于B组,在培养的第11~12 d,B组中部分细胞表现为胞体锥形并有长突起的神经元样形态,且形成网状.A组中随着培养时间的延长仅仅有nestin表达增加 ,B组中Nestin, GFAP, MAP-2的表达随时间的不同有差异,S-100在体积较小的细胞表达较强.B组细胞培养的第10d,检测到BDNF的表达,培养第7,10,13 d检测到NGF分泌.结论人骨髓基质细胞在含血清培养基中能够表达神经前体细胞和神经细胞的相关表面标志物,并且能够分泌一定水平的神经营养因子,表现出可分化成神经细胞的潜能.血清和骨髓基质细胞自身分泌物质的蓄积可能在其中起到了重要的作用.
目的研究骨髓基質細胞在含血清培養基中嚮神經細胞分化的潛能.方法從健康人肋骨分離原代骨髓基質細胞,接種于含10%胎牛血清(FBS)的DMEM中,分為A組(3~4 d換液一次)、B組(不換液),在相差顯微鏡下觀察生長情況.在培養的1,5,10 d用免疫熒光法檢測兩組骨髓基質細胞的各種錶麵標誌物巢蛋白(nestin)、膠質纖維痠性蛋白(GFAP)、微管相關蛋白(MAP-2)、S-100錶達情況.併在培養的第1,4,7,10,13 d用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測 B組培養細胞上清中的腦源性神經營養因子(BDNF)和神經生長因子(NGF)的分泌水平.結果 A組細胞分裂繁殖速度明顯高于B組,在培養的第11~12 d,B組中部分細胞錶現為胞體錐形併有長突起的神經元樣形態,且形成網狀.A組中隨著培養時間的延長僅僅有nestin錶達增加 ,B組中Nestin, GFAP, MAP-2的錶達隨時間的不同有差異,S-100在體積較小的細胞錶達較彊.B組細胞培養的第10d,檢測到BDNF的錶達,培養第7,10,13 d檢測到NGF分泌.結論人骨髓基質細胞在含血清培養基中能夠錶達神經前體細胞和神經細胞的相關錶麵標誌物,併且能夠分泌一定水平的神經營養因子,錶現齣可分化成神經細胞的潛能.血清和骨髓基質細胞自身分泌物質的蓄積可能在其中起到瞭重要的作用.
목적연구골수기질세포재함혈청배양기중향신경세포분화적잠능.방법종건강인륵골분리원대골수기질세포,접충우함10%태우혈청(FBS)적DMEM중,분위A조(3~4 d환액일차)、B조(불환액),재상차현미경하관찰생장정황.재배양적1,5,10 d용면역형광법검측량조골수기질세포적각충표면표지물소단백(nestin)、효질섬유산성단백(GFAP)、미관상관단백(MAP-2)、S-100표체정황.병재배양적제1,4,7,10,13 d용매련면역흡부법(ELISA)검측 B조배양세포상청중적뇌원성신경영양인자(BDNF)화신경생장인자(NGF)적분비수평.결과 A조세포분렬번식속도명현고우B조,재배양적제11~12 d,B조중부분세포표현위포체추형병유장돌기적신경원양형태,차형성망상.A조중수착배양시간적연장부부유nestin표체증가 ,B조중Nestin, GFAP, MAP-2적표체수시간적불동유차이,S-100재체적교소적세포표체교강.B조세포배양적제10d,검측도BDNF적표체,배양제7,10,13 d검측도NGF분비.결론인골수기질세포재함혈청배양기중능구표체신경전체세포화신경세포적상관표면표지물,병차능구분비일정수평적신경영양인자,표현출가분화성신경세포적잠능.혈청화골수기질세포자신분비물질적축적가능재기중기도료중요적작용.