中国医学科学院学报
中國醫學科學院學報
중국의학과학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SINICAE
2008年
3期
284-289
,共6页
林蓓%郝莹莹%王冬冬%朱连成%张淑兰%齐藤真木子%岩森正男
林蓓%郝瑩瑩%王鼕鼕%硃連成%張淑蘭%齊籐真木子%巖森正男
림배%학형형%왕동동%주련성%장숙란%제등진목자%암삼정남
卵巢肿瘤%α1,2-岩藻糖基转移酶%基因%转染%Lewis抗原
卵巢腫瘤%α1,2-巖藻糖基轉移酶%基因%轉染%Lewis抗原
란소종류%α1,2-암조당기전이매%기인%전염%Lewis항원
目的 将人α1,2-岩藻糖基转移酶(α1,2-FT)基因转染卵巢癌细胞系RMG-I并探讨细胞表面Lewis y及其他相关糖脂抗原的变化.方法 采用PCR方法 克隆人α1,2-FT基因编码区HFUT-H,构建表达载体pcDNA3.1(-)-HFUT-H,利用磷酸钙法将其转染入卵巢癌细胞系RMG-I,建立α1,2-FT基因稳定高表达细胞株RMG-I-H.通过酶活性测定证明转染前后细胞系α1,2-FT活性的改变,采用薄层层析、薄层层析免疫染色方法 测定转染前后细胞脂质及糖脂,特别是Ⅱ型寡糖的变化. 结果 基因转染后细胞RMG-I-H中H-1抗原及Lewis y抗原显著增加,特别是Lewis y抗原为转染前的20倍;而Ⅰ型糖链Lewis b显著减少.转染前后细胞膜上的主要脂质成分胆固醇和磷脂质的含量没有变化,且中性糖脂质也没有明显变化.结论 α1,2-FT基因转染增加α1,2-FT活性的同时,增加卵巢癌细胞系RMG-I Lewis y抗原的表达;RMG-I Lewis y高表达细胞系的建立为研究Lewis y抗原与卵巢癌生物学行为提供了细胞模型.
目的 將人α1,2-巖藻糖基轉移酶(α1,2-FT)基因轉染卵巢癌細胞繫RMG-I併探討細胞錶麵Lewis y及其他相關糖脂抗原的變化.方法 採用PCR方法 剋隆人α1,2-FT基因編碼區HFUT-H,構建錶達載體pcDNA3.1(-)-HFUT-H,利用燐痠鈣法將其轉染入卵巢癌細胞繫RMG-I,建立α1,2-FT基因穩定高錶達細胞株RMG-I-H.通過酶活性測定證明轉染前後細胞繫α1,2-FT活性的改變,採用薄層層析、薄層層析免疫染色方法 測定轉染前後細胞脂質及糖脂,特彆是Ⅱ型寡糖的變化. 結果 基因轉染後細胞RMG-I-H中H-1抗原及Lewis y抗原顯著增加,特彆是Lewis y抗原為轉染前的20倍;而Ⅰ型糖鏈Lewis b顯著減少.轉染前後細胞膜上的主要脂質成分膽固醇和燐脂質的含量沒有變化,且中性糖脂質也沒有明顯變化.結論 α1,2-FT基因轉染增加α1,2-FT活性的同時,增加卵巢癌細胞繫RMG-I Lewis y抗原的錶達;RMG-I Lewis y高錶達細胞繫的建立為研究Lewis y抗原與卵巢癌生物學行為提供瞭細胞模型.
목적 장인α1,2-암조당기전이매(α1,2-FT)기인전염란소암세포계RMG-I병탐토세포표면Lewis y급기타상관당지항원적변화.방법 채용PCR방법 극륭인α1,2-FT기인편마구HFUT-H,구건표체재체pcDNA3.1(-)-HFUT-H,이용린산개법장기전염입란소암세포계RMG-I,건립α1,2-FT기인은정고표체세포주RMG-I-H.통과매활성측정증명전염전후세포계α1,2-FT활성적개변,채용박층층석、박층층석면역염색방법 측정전염전후세포지질급당지,특별시Ⅱ형과당적변화. 결과 기인전염후세포RMG-I-H중H-1항원급Lewis y항원현저증가,특별시Lewis y항원위전염전적20배;이Ⅰ형당련Lewis b현저감소.전염전후세포막상적주요지질성분담고순화린지질적함량몰유변화,차중성당지질야몰유명현변화.결론 α1,2-FT기인전염증가α1,2-FT활성적동시,증가란소암세포계RMG-I Lewis y항원적표체;RMG-I Lewis y고표체세포계적건립위연구Lewis y항원여란소암생물학행위제공료세포모형.
