农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2010年
4期
777-782
,共6页
黎涛%贺明阳%王跃进%余皓
黎濤%賀明暘%王躍進%餘皓
려도%하명양%왕약진%여호
华东葡萄%抗白粉病%转录因子%克隆%亚细胞定位
華東葡萄%抗白粉病%轉錄因子%剋隆%亞細胞定位
화동포도%항백분병%전록인자%극륭%아세포정위
以抗白粉病华东葡萄(Vitis pseudoreticulata W.T.Wang)株系白河-35-1为材料,在经葡萄白粉病病原菌(Uncinula necator(Schw.)Burr.)诱导后获得的EST序列的基础上,本研究通过RACE技术克隆了一个具有转录域的转录因子全长1324 bp cDNA序列,其阅读框为1053 bp,编码350个氨基酸,命名为VpRFL1(GenBank登录号:FJ356672).应用PCR技术,进一步获得了转录因子VpRFL1基因的DNA序列,其序列全长1599 bp,VpRFL1基因包含3个外显子,2个内含子.生物信息学分析表明,华东葡萄白河-35-1 VpRFL1基因编码的氨基酸序列在N端含有核定位信号,C端含有C4C4型RING锌指结构域.VpRFL1/PBI221-GFP在洋葱(Allium cepa)表皮细胞中的瞬时表达分析表明,该转录因子主要定位于细胞核内.VpRFL1的序列特征与定位分析结果初步表明该转录因子基因在核内起作用,并可能参与了抗逆反应的相关途径.
以抗白粉病華東葡萄(Vitis pseudoreticulata W.T.Wang)株繫白河-35-1為材料,在經葡萄白粉病病原菌(Uncinula necator(Schw.)Burr.)誘導後穫得的EST序列的基礎上,本研究通過RACE技術剋隆瞭一箇具有轉錄域的轉錄因子全長1324 bp cDNA序列,其閱讀框為1053 bp,編碼350箇氨基痠,命名為VpRFL1(GenBank登錄號:FJ356672).應用PCR技術,進一步穫得瞭轉錄因子VpRFL1基因的DNA序列,其序列全長1599 bp,VpRFL1基因包含3箇外顯子,2箇內含子.生物信息學分析錶明,華東葡萄白河-35-1 VpRFL1基因編碼的氨基痠序列在N耑含有覈定位信號,C耑含有C4C4型RING鋅指結構域.VpRFL1/PBI221-GFP在洋蔥(Allium cepa)錶皮細胞中的瞬時錶達分析錶明,該轉錄因子主要定位于細胞覈內.VpRFL1的序列特徵與定位分析結果初步錶明該轉錄因子基因在覈內起作用,併可能參與瞭抗逆反應的相關途徑.
이항백분병화동포도(Vitis pseudoreticulata W.T.Wang)주계백하-35-1위재료,재경포도백분병병원균(Uncinula necator(Schw.)Burr.)유도후획득적EST서렬적기출상,본연구통과RACE기술극륭료일개구유전록역적전록인자전장1324 bp cDNA서렬,기열독광위1053 bp,편마350개안기산,명명위VpRFL1(GenBank등록호:FJ356672).응용PCR기술,진일보획득료전록인자VpRFL1기인적DNA서렬,기서렬전장1599 bp,VpRFL1기인포함3개외현자,2개내함자.생물신식학분석표명,화동포도백하-35-1 VpRFL1기인편마적안기산서렬재N단함유핵정위신호,C단함유C4C4형RING자지결구역.VpRFL1/PBI221-GFP재양총(Allium cepa)표피세포중적순시표체분석표명,해전록인자주요정위우세포핵내.VpRFL1적서렬특정여정위분석결과초보표명해전록인자기인재핵내기작용,병가능삼여료항역반응적상관도경.