生物学杂志
生物學雜誌
생물학잡지
JOURNAL OF BIOLOGY
2011年
5期
30-33,5
,共5页
汉素珍%王有科%李明%李岁成
漢素珍%王有科%李明%李歲成
한소진%왕유과%리명%리세성
花椒%ISSR-PCR%正交设计%单因子试验
花椒%ISSR-PCR%正交設計%單因子試驗
화초%ISSR-PCR%정교설계%단인자시험
采用单因子试验和正交设计2种方法对影响花椒ISSR-PCR反应体系的4个因素(TaqDNA聚合酶、Mg2+、dNTP、引物)在3个水平上进行优化试验.选用L9(34) 正交设计方案,从电泳结果中直观获得影响因素的最佳组合.单因子试验分别研究各影响因素不同含量对ISSR-PCR反应的影响情况,找出最佳反应水平.结果表明,适宜花椒ISSR-PCR反应的最佳体系为:20μL的反应体系中,Taq酶1.0U,Mg2+2.0 mmol/L,dNTP 0.2mmol/L,引物1.0μmol/L,10×PCR buffer2.5μL,50 ng模板DNA,53℃退火,35个循环.
採用單因子試驗和正交設計2種方法對影響花椒ISSR-PCR反應體繫的4箇因素(TaqDNA聚閤酶、Mg2+、dNTP、引物)在3箇水平上進行優化試驗.選用L9(34) 正交設計方案,從電泳結果中直觀穫得影響因素的最佳組閤.單因子試驗分彆研究各影響因素不同含量對ISSR-PCR反應的影響情況,找齣最佳反應水平.結果錶明,適宜花椒ISSR-PCR反應的最佳體繫為:20μL的反應體繫中,Taq酶1.0U,Mg2+2.0 mmol/L,dNTP 0.2mmol/L,引物1.0μmol/L,10×PCR buffer2.5μL,50 ng模闆DNA,53℃退火,35箇循環.
채용단인자시험화정교설계2충방법대영향화초ISSR-PCR반응체계적4개인소(TaqDNA취합매、Mg2+、dNTP、인물)재3개수평상진행우화시험.선용L9(34) 정교설계방안,종전영결과중직관획득영향인소적최가조합.단인자시험분별연구각영향인소불동함량대ISSR-PCR반응적영향정황,조출최가반응수평.결과표명,괄의화초ISSR-PCR반응적최가체계위:20μL적반응체계중,Taq매1.0U,Mg2+2.0 mmol/L,dNTP 0.2mmol/L,인물1.0μmol/L,10×PCR buffer2.5μL,50 ng모판DNA,53℃퇴화,35개순배.
