中国畜牧杂志
中國畜牧雜誌
중국축목잡지
CHINESE JOURNAL OF ANIMAL SCIENCE
2012年
7期
19-22,50
,共5页
周光斌%孟庆勇%丁方荣%戴蕴平%李秋艳%李宁
週光斌%孟慶勇%丁方榮%戴蘊平%李鞦豔%李寧
주광빈%맹경용%정방영%대온평%리추염%리저
胚胎干细胞%细胞培养%碱性磷酸酶%ICR小鼠
胚胎榦細胞%細胞培養%堿性燐痠酶%ICR小鼠
배태간세포%세포배양%감성린산매%ICR소서
实验旨在探讨消化方式和胚胎发育阶段对ICR小鼠胚胎干细胞(ES细胞)建系效率的影响.ICR小鼠3.5 d囊胚在饲养层上贴壁后采用单一酶消化或机械化与酶消化法相结合分离隆起的细胞集落,进行传代培养；然后选择二者中较优消化方式对不同发育时期囊胚所形成的细胞集落进行处理.结果表明:采用机械化与胰酶消化相结合的方式,形成的类ES细胞超过7代的比率(85.0％)要显著高于单一的胰酶消化(15.0％)(P＜0.05)；当用二者相结合的方式对ICR小鼠3.5 d(早期囊胚)、4.0 d(扩张囊胚)和4.5 d(孵化囊胚)所形成的细胞集落进行消化传代培养,三者在贴壁率和形成原代细胞集落率上均无显著差别(P＞0.05),但传代超过7代的效率上早期囊胚和扩张囊胚均高于孵化囊胚(P＜0.05).结果提示,采用机械化与酶消化法相结合更适合于3.5～4.0 d ICR小鼠囊胚的ES细胞建系.
實驗旨在探討消化方式和胚胎髮育階段對ICR小鼠胚胎榦細胞(ES細胞)建繫效率的影響.ICR小鼠3.5 d囊胚在飼養層上貼壁後採用單一酶消化或機械化與酶消化法相結閤分離隆起的細胞集落,進行傳代培養；然後選擇二者中較優消化方式對不同髮育時期囊胚所形成的細胞集落進行處理.結果錶明:採用機械化與胰酶消化相結閤的方式,形成的類ES細胞超過7代的比率(85.0％)要顯著高于單一的胰酶消化(15.0％)(P＜0.05)；噹用二者相結閤的方式對ICR小鼠3.5 d(早期囊胚)、4.0 d(擴張囊胚)和4.5 d(孵化囊胚)所形成的細胞集落進行消化傳代培養,三者在貼壁率和形成原代細胞集落率上均無顯著差彆(P＞0.05),但傳代超過7代的效率上早期囊胚和擴張囊胚均高于孵化囊胚(P＜0.05).結果提示,採用機械化與酶消化法相結閤更適閤于3.5～4.0 d ICR小鼠囊胚的ES細胞建繫.
실험지재탐토소화방식화배태발육계단대ICR소서배태간세포(ES세포)건계효솔적영향.ICR소서3.5 d낭배재사양층상첩벽후채용단일매소화혹궤계화여매소화법상결합분리륭기적세포집락,진행전대배양；연후선택이자중교우소화방식대불동발육시기낭배소형성적세포집락진행처리.결과표명:채용궤계화여이매소화상결합적방식,형성적류ES세포초과7대적비솔(85.0％)요현저고우단일적이매소화(15.0％)(P＜0.05)；당용이자상결합적방식대ICR소서3.5 d(조기낭배)、4.0 d(확장낭배)화4.5 d(부화낭배)소형성적세포집락진행소화전대배양,삼자재첩벽솔화형성원대세포집락솔상균무현저차별(P＞0.05),단전대초과7대적효솔상조기낭배화확장낭배균고우부화낭배(P＜0.05).결과제시,채용궤계화여매소화법상결합경괄합우3.5～4.0 d ICR소서낭배적ES세포건계.
