中华血液学杂志
中華血液學雜誌
중화혈액학잡지
Chinese Journal of Hematology
2001年
11期
584-588
,共5页
国风%岑建农%陈子兴%王玮%傅建新%阳小卫
國風%岑建農%陳子興%王瑋%傅建新%暘小衛
국풍%잠건농%진자흥%왕위%부건신%양소위
洛伐他汀%细胞系,NB4%细胞增殖%细胞凋亡%基因,ras
洛伐他汀%細胞繫,NB4%細胞增殖%細胞凋亡%基因,ras
락벌타정%세포계,NB4%세포증식%세포조망%기인,ras
目的研究胆固醇合成抑制剂洛伐他汀(Lovastatin,LOV)对NB4白血病细胞增殖、凋亡、分化的影响.方法以NB4白血病细胞为模型,用MTT比色法、锥虫蓝拒染法首先观察LOV对细胞增殖及活力的影响.通过细胞形态学观察、NBT还原试验、DNA凝胶电泳、流式细胞术细胞周期分析、TUNEL、RT-PCR半定量测定bcl-2 mRNA水平,系统观察LOV对NB4体外诱导分化和凋亡的情况.最后利用RT-PCR半定量测定H、K、N-ras基因表达水平,结合流式细胞术进行胞膜p21Ras蛋白测定,探讨LOV作用机制.结果①LOV抑制NB4细胞增殖,IC50为12.59?μmol/L.②LOV诱导NB4细胞凋亡,影响细胞周期进程,细胞阻滞于G1/S期.LOV在诱导细胞凋亡过程中随作用时间延长,bcl-2表达水平逐渐下降.③LOV不影响NB4细胞分化.④LOV作用于NB4细胞,H、K、N-ras基因转录水平无变化,但膜表面p21Ras蛋白水平随时间进行性下降.结论 LOV抑制NB4细胞增殖并诱导凋亡,使细胞周期进程阻滞于G1/S期.bcl-2参与了LOV诱导NB4细胞凋亡的基因调控.LOV对NB4细胞分化无影响.p21Ras蛋白异戊二烯化受抑而阻滞p21Ras蛋白定位于细胞膜上可能是LOV影响NB4细胞的主要机制.
目的研究膽固醇閤成抑製劑洛伐他汀(Lovastatin,LOV)對NB4白血病細胞增殖、凋亡、分化的影響.方法以NB4白血病細胞為模型,用MTT比色法、錐蟲藍拒染法首先觀察LOV對細胞增殖及活力的影響.通過細胞形態學觀察、NBT還原試驗、DNA凝膠電泳、流式細胞術細胞週期分析、TUNEL、RT-PCR半定量測定bcl-2 mRNA水平,繫統觀察LOV對NB4體外誘導分化和凋亡的情況.最後利用RT-PCR半定量測定H、K、N-ras基因錶達水平,結閤流式細胞術進行胞膜p21Ras蛋白測定,探討LOV作用機製.結果①LOV抑製NB4細胞增殖,IC50為12.59?μmol/L.②LOV誘導NB4細胞凋亡,影響細胞週期進程,細胞阻滯于G1/S期.LOV在誘導細胞凋亡過程中隨作用時間延長,bcl-2錶達水平逐漸下降.③LOV不影響NB4細胞分化.④LOV作用于NB4細胞,H、K、N-ras基因轉錄水平無變化,但膜錶麵p21Ras蛋白水平隨時間進行性下降.結論 LOV抑製NB4細胞增殖併誘導凋亡,使細胞週期進程阻滯于G1/S期.bcl-2參與瞭LOV誘導NB4細胞凋亡的基因調控.LOV對NB4細胞分化無影響.p21Ras蛋白異戊二烯化受抑而阻滯p21Ras蛋白定位于細胞膜上可能是LOV影響NB4細胞的主要機製.
목적연구담고순합성억제제락벌타정(Lovastatin,LOV)대NB4백혈병세포증식、조망、분화적영향.방법이NB4백혈병세포위모형,용MTT비색법、추충람거염법수선관찰LOV대세포증식급활력적영향.통과세포형태학관찰、NBT환원시험、DNA응효전영、류식세포술세포주기분석、TUNEL、RT-PCR반정량측정bcl-2 mRNA수평,계통관찰LOV대NB4체외유도분화화조망적정황.최후이용RT-PCR반정량측정H、K、N-ras기인표체수평,결합류식세포술진행포막p21Ras단백측정,탐토LOV작용궤제.결과①LOV억제NB4세포증식,IC50위12.59?μmol/L.②LOV유도NB4세포조망,영향세포주기진정,세포조체우G1/S기.LOV재유도세포조망과정중수작용시간연장,bcl-2표체수평축점하강.③LOV불영향NB4세포분화.④LOV작용우NB4세포,H、K、N-ras기인전록수평무변화,단막표면p21Ras단백수평수시간진행성하강.결론 LOV억제NB4세포증식병유도조망,사세포주기진정조체우G1/S기.bcl-2삼여료LOV유도NB4세포조망적기인조공.LOV대NB4세포분화무영향.p21Ras단백이무이희화수억이조체p21Ras단백정위우세포막상가능시LOV영향NB4세포적주요궤제.