中国农业科技导报
中國農業科技導報
중국농업과기도보
REVIEW OF CHINA AGRICULTURAL SCIENCE AND TECHNOLOGY
2012年
5期
71-77
,共7页
聂春明%宁晓彦%张宇宏%樊晓虎%赵国芬%张伟
聶春明%寧曉彥%張宇宏%樊曉虎%趙國芬%張偉
섭춘명%저효언%장우굉%번효호%조국분%장위
乳糖酶%双歧杆菌%毕赤酵母%融合表达
乳糖酶%雙歧桿菌%畢赤酵母%融閤錶達
유당매%쌍기간균%필적효모%융합표체
双歧杆菌来源的乳糖酶具有催化效率高,安全性好等优点,在乳糖水解和低聚半乳糖生产等领域中应用潜力巨大.以来源于动物双岐杆菌(Bifidobacterium animalis B106)的乳糖酶基因bg42-106m为对象,将4种标签蛋白基因cherry、cbd( cellulose-binding domains)、gst( glutathione S-transferase)、mbp( maltose-binding protein)分别与bg42-106m基因连接,然后以pPIC9为载体构建融合蛋白重组表达载体,并在毕赤酵母GS115中进行诱导表达.结果表明,当融合Cherry标签蛋白基因后,可显著提高bG42-106M在毕赤酵母中的蛋白分泌表达量,培养基中乳糖酶活力可达到7.42 U/mL.与未融合标签的野生型菌株相比,乳糖酶bG42-106M的分泌表达量提高了290%.而其他3种标签蛋白没有提高bG42-106M的分泌表达量.
雙歧桿菌來源的乳糖酶具有催化效率高,安全性好等優點,在乳糖水解和低聚半乳糖生產等領域中應用潛力巨大.以來源于動物雙岐桿菌(Bifidobacterium animalis B106)的乳糖酶基因bg42-106m為對象,將4種標籤蛋白基因cherry、cbd( cellulose-binding domains)、gst( glutathione S-transferase)、mbp( maltose-binding protein)分彆與bg42-106m基因連接,然後以pPIC9為載體構建融閤蛋白重組錶達載體,併在畢赤酵母GS115中進行誘導錶達.結果錶明,噹融閤Cherry標籤蛋白基因後,可顯著提高bG42-106M在畢赤酵母中的蛋白分泌錶達量,培養基中乳糖酶活力可達到7.42 U/mL.與未融閤標籤的野生型菌株相比,乳糖酶bG42-106M的分泌錶達量提高瞭290%.而其他3種標籤蛋白沒有提高bG42-106M的分泌錶達量.
쌍기간균래원적유당매구유최화효솔고,안전성호등우점,재유당수해화저취반유당생산등영역중응용잠력거대.이래원우동물쌍기간균(Bifidobacterium animalis B106)적유당매기인bg42-106m위대상,장4충표첨단백기인cherry、cbd( cellulose-binding domains)、gst( glutathione S-transferase)、mbp( maltose-binding protein)분별여bg42-106m기인련접,연후이pPIC9위재체구건융합단백중조표체재체,병재필적효모GS115중진행유도표체.결과표명,당융합Cherry표첨단백기인후,가현저제고bG42-106M재필적효모중적단백분비표체량,배양기중유당매활력가체도7.42 U/mL.여미융합표첨적야생형균주상비,유당매bG42-106M적분비표체량제고료290%.이기타3충표첨단백몰유제고bG42-106M적분비표체량.