CAJ | 학술논문

为优化猪精子载体法技术参数,利用荧光定量PCR、荧光显微镜检测和精液常规检测方法,分析不同DNA转染剂、不同孵育温度和不同形态DNA对猪精子转染外源DNA的影响.结果表明,PEI和TransFast转染剂能极显著提高猪精子转染效果,且PEI优于TransFast,而NanoFect转染剂包裹DNA不能转染精子.随着转染温度的升高,精子的活力和活率均明显下降,而转染率和内化外源DNA量基本保持稳定,而吸附外源DNA量呈下降趋势.环状DNA和线性化DNA在与精子共孵育后,两者的精子活力、活率、转染率和内化外源DNA量差异均不显著,精子吸附线性化DNA量极显著高于环状DNA量.综合分析表明,外源DNA形态对猪精子转染效果无显著影响；PEI和TransFast能够显著提高猪精子转染效果；共孵育温度以17℃为最佳,本结果为开展精子载体法制备转基因猪研究提供了基础试验依据.
위우화저정자재체법기술삼수,이용형광정량PCR、형광현미경검측화정액상규검측방법,분석불동DNA전염제、불동부육온도화불동형태DNA대저정자전염외원DNA적영향.결과표명,PEI화TransFast전염제능겁현저제고저정자전염효과,차PEI우우TransFast,이NanoFect전염제포과DNA불능전염정자.수착전염온도적승고,정자적활력화활솔균명현하강,이전염솔화내화외원DNA량기본보지은정,이흡부외원DNA량정하강추세.배상DNA화선성화DNA재여정자공부육후,량자적정자활력、활솔、전염솔화내화외원DNA량차이균불현저,정자흡부선성화DNA량겁현저고우배상DNA량.종합분석표명,외원DNA형태대저정자전염효과무현저영향；PEI화TransFast능구현저제고저정자전염효과；공부육온도이17℃위최가,본결과위개전정자재체법제비전기인저연구제공료기출시험의거.