中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2011年
12期
970-973
,共4页
吕闯%朱远茂%董秀梅%蔡红%于作%高欲燃%薛飞
呂闖%硃遠茂%董秀梅%蔡紅%于作%高欲燃%薛飛
려틈%주원무%동수매%채홍%우작%고욕연%설비
牛副流感病毒3型%核衣壳蛋白%单克隆抗体%特异性
牛副流感病毒3型%覈衣殼蛋白%單剋隆抗體%特異性
우부류감병독3형%핵의각단백%단극륭항체%특이성
为制备牛副流感病毒3型(BPIV3)核衣壳蛋白(NP)单克隆抗体(MAb),本研究利用原核表达并纯化的重组NP (rNP)免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合.采用以BPIV3为检测抗原的间接ELISA方法筛选阳性细胞克隆,经3次克隆纯化后获得1株稳定分泌抗NP特异性MAb的杂交瘤细胞株(5E5)并制备腹水,采用rNP及BPIV3包被的ELISA效价分别是2×106和1.28×105.间接ELISA、western blot、IFA试验表明该MAb具有良好的反应性和特异性.经抗体亚类鉴定该MAb亚类为IgGl/κ.特异性试验表明该MAb不与牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒性腹泻病毒反应.免疫组化试验表明该MAb可以检测BPIV3感染动物体内的病原.该MAb还可用于建立检测BPIV3病原及抗体的诊断方法,同时为研究NP的结构和功能提供了条件.
為製備牛副流感病毒3型(BPIV3)覈衣殼蛋白(NP)單剋隆抗體(MAb),本研究利用原覈錶達併純化的重組NP (rNP)免疫BALB/c小鼠,取免疫後小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞SP2/0融閤.採用以BPIV3為檢測抗原的間接ELISA方法篩選暘性細胞剋隆,經3次剋隆純化後穫得1株穩定分泌抗NP特異性MAb的雜交瘤細胞株(5E5)併製備腹水,採用rNP及BPIV3包被的ELISA效價分彆是2×106和1.28×105.間接ELISA、western blot、IFA試驗錶明該MAb具有良好的反應性和特異性.經抗體亞類鑒定該MAb亞類為IgGl/κ.特異性試驗錶明該MAb不與牛傳染性鼻氣管炎病毒、牛病毒性腹瀉病毒反應.免疫組化試驗錶明該MAb可以檢測BPIV3感染動物體內的病原.該MAb還可用于建立檢測BPIV3病原及抗體的診斷方法,同時為研究NP的結構和功能提供瞭條件.
위제비우부류감병독3형(BPIV3)핵의각단백(NP)단극륭항체(MAb),본연구이용원핵표체병순화적중조NP (rNP)면역BALB/c소서,취면역후소서비세포여골수류세포SP2/0융합.채용이BPIV3위검측항원적간접ELISA방법사선양성세포극륭,경3차극륭순화후획득1주은정분비항NP특이성MAb적잡교류세포주(5E5)병제비복수,채용rNP급BPIV3포피적ELISA효개분별시2×106화1.28×105.간접ELISA、western blot、IFA시험표명해MAb구유량호적반응성화특이성.경항체아류감정해MAb아류위IgGl/κ.특이성시험표명해MAb불여우전염성비기관염병독、우병독성복사병독반응.면역조화시험표명해MAb가이검측BPIV3감염동물체내적병원.해MAb환가용우건립검측BPIV3병원급항체적진단방법,동시위연구NP적결구화공능제공료조건.
