企业技术开发（下半月）
企業技術開髮（下半月）
기업기술개발（하반월）
TECHNOLOGICAL DEVELOPMENT OF ENTERPRISE
2011年
3期
54-54
,共1页
白蛋白%梯度洗脱
白蛋白%梯度洗脫
백단백%제도세탈
通过对白蛋白的表达上清进行纯化,得到高纯度的白蛋白,并对其浓度、纯度和特异性等进行鉴定.通过盐析使表达上清浓缩,透析脱盐后,经过强阳离子交换层析(SP sepharose Fast Rlow),使用不同浓度的Nacl对表达上清进行梯度洗脱,得到的目的蛋白用BcA法测定其浓度,再用SDS-PAGE确定目的蛋白的分子量大小和洗脱浓度并使用Bandscan软件对其纯度进行分析,最后用Westem blot鉴定目的蛋白的特异性.盐析使其表达上清10倍浓缩,经过SP Sepharose Fast Flow介质纯化,在0.3M Nacl洗脱出目的蛋白,浓度为262.36μg/ml,纯度为96.9%,收率为31.54%.通过使用盐析和强阳离子交换层析的方法能够纯化出浓度和纯度都很高的白蛋白,并有较高的收率,为今后白蛋白的大规模生产奠定了基础,也为白蛋白的进一步研究开拓了更为广阔的前景.
通過對白蛋白的錶達上清進行純化,得到高純度的白蛋白,併對其濃度、純度和特異性等進行鑒定.通過鹽析使錶達上清濃縮,透析脫鹽後,經過彊暘離子交換層析(SP sepharose Fast Rlow),使用不同濃度的Nacl對錶達上清進行梯度洗脫,得到的目的蛋白用BcA法測定其濃度,再用SDS-PAGE確定目的蛋白的分子量大小和洗脫濃度併使用Bandscan軟件對其純度進行分析,最後用Westem blot鑒定目的蛋白的特異性.鹽析使其錶達上清10倍濃縮,經過SP Sepharose Fast Flow介質純化,在0.3M Nacl洗脫齣目的蛋白,濃度為262.36μg/ml,純度為96.9%,收率為31.54%.通過使用鹽析和彊暘離子交換層析的方法能夠純化齣濃度和純度都很高的白蛋白,併有較高的收率,為今後白蛋白的大規模生產奠定瞭基礎,也為白蛋白的進一步研究開拓瞭更為廣闊的前景.
통과대백단백적표체상청진행순화,득도고순도적백단백,병대기농도、순도화특이성등진행감정.통과염석사표체상청농축,투석탈염후,경과강양리자교환층석(SP sepharose Fast Rlow),사용불동농도적Nacl대표체상청진행제도세탈,득도적목적단백용BcA법측정기농도,재용SDS-PAGE학정목적단백적분자량대소화세탈농도병사용Bandscan연건대기순도진행분석,최후용Westem blot감정목적단백적특이성.염석사기표체상청10배농축,경과SP Sepharose Fast Flow개질순화,재0.3M Nacl세탈출목적단백,농도위262.36μg/ml,순도위96.9%,수솔위31.54%.통과사용염석화강양리자교환층석적방법능구순화출농도화순도도흔고적백단백,병유교고적수솔,위금후백단백적대규모생산전정료기출,야위백단백적진일보연구개탁료경위엄활적전경.
