基因组学与应用生物学
基因組學與應用生物學
기인조학여응용생물학
GENOMICS AND APPLIED BIOLOGY
2010年
6期
1177-1183
,共7页
王恒波%陈平华%郭晋隆%陈如凯%许莉萍
王恆波%陳平華%郭晉隆%陳如凱%許莉萍
왕항파%진평화%곽진륭%진여개%허리평
转基因大豆%GTS40-3-2%转化事件%特异性PCR检测
轉基因大豆%GTS40-3-2%轉化事件%特異性PCR檢測
전기인대두%GTS40-3-2%전화사건%특이성PCR검측
GTS40-3-2是抗草甘膦转基因大豆,为建立GTS40-3-2大豆转化体特异性PCR检测方法,本研究以GTS40-3-2标准品为实验材料,根据己公布转基因大豆GTS40-3-2基因与大豆基因组连接序列信息,利用Primer 5.0软件设计了5对品系特异性引物,对每对引物进行了退火温度、特异性及扩增效率的PCR检测,结果显示,5对特异性引物均能够从GTS40-3-2中扩增出大小约279 bp、238 bp、470 bp、490 bp和257 bp的预期产物,可用于特异性检测转基因大豆GTS40-3-2转化事件.以转基因大豆GTS40-3-2含量为5%、2%、1%、0.5%和0.1%的标准品进行PCR灵敏度检测,结果表明5对引物的检测灵敏度均能达到0.1%.通过荧光定量PCR对5对特异性引物的Ct值与溶解曲线比较,最后选择出RRS2引物对为转基因大豆GTS40-3-2品系特异性检测的最适引物.本文结果将为我国未来转基因生物产品成分检测提供科学合理的实验参考.
GTS40-3-2是抗草甘膦轉基因大豆,為建立GTS40-3-2大豆轉化體特異性PCR檢測方法,本研究以GTS40-3-2標準品為實驗材料,根據己公佈轉基因大豆GTS40-3-2基因與大豆基因組連接序列信息,利用Primer 5.0軟件設計瞭5對品繫特異性引物,對每對引物進行瞭退火溫度、特異性及擴增效率的PCR檢測,結果顯示,5對特異性引物均能夠從GTS40-3-2中擴增齣大小約279 bp、238 bp、470 bp、490 bp和257 bp的預期產物,可用于特異性檢測轉基因大豆GTS40-3-2轉化事件.以轉基因大豆GTS40-3-2含量為5%、2%、1%、0.5%和0.1%的標準品進行PCR靈敏度檢測,結果錶明5對引物的檢測靈敏度均能達到0.1%.通過熒光定量PCR對5對特異性引物的Ct值與溶解麯線比較,最後選擇齣RRS2引物對為轉基因大豆GTS40-3-2品繫特異性檢測的最適引物.本文結果將為我國未來轉基因生物產品成分檢測提供科學閤理的實驗參攷.
GTS40-3-2시항초감련전기인대두,위건립GTS40-3-2대두전화체특이성PCR검측방법,본연구이GTS40-3-2표준품위실험재료,근거기공포전기인대두GTS40-3-2기인여대두기인조련접서렬신식,이용Primer 5.0연건설계료5대품계특이성인물,대매대인물진행료퇴화온도、특이성급확증효솔적PCR검측,결과현시,5대특이성인물균능구종GTS40-3-2중확증출대소약279 bp、238 bp、470 bp、490 bp화257 bp적예기산물,가용우특이성검측전기인대두GTS40-3-2전화사건.이전기인대두GTS40-3-2함량위5%、2%、1%、0.5%화0.1%적표준품진행PCR령민도검측,결과표명5대인물적검측령민도균능체도0.1%.통과형광정량PCR대5대특이성인물적Ct치여용해곡선비교,최후선택출RRS2인물대위전기인대두GTS40-3-2품계특이성검측적최괄인물.본문결과장위아국미래전기인생물산품성분검측제공과학합리적실험삼고.