中西医结合学报
中西醫結閤學報
중서의결합학보
JOURNAL OF CHINESE INTEGRATIVE MDEICINE
2010年
11期
1060-1069
,共10页
梁雅慧%李萍%赵京霞%刘欣%黄启福
樑雅慧%李萍%趙京霞%劉訢%黃啟福
량아혜%리평%조경하%류흔%황계복
11-羰基-β-乙酰乳香酸%三氧化二砷%成纤维细胞%单核细胞%THP-1%基质金属蛋白酶类
11-羰基-β-乙酰乳香痠%三氧化二砷%成纖維細胞%單覈細胞%THP-1%基質金屬蛋白酶類
11-탄기-β-을선유향산%삼양화이신%성섬유세포%단핵세포%THP-1%기질금속단백매류
目的:探讨乳香、砒石主要单体成分11-羰基-β-乙酰乳香酸(acetyl-11-keto-beta-boswellic acid,AKBA)与三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)配伍对人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast,HSFb)、人单核细胞系THP-1细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-1、MMP-2和MMP-9的调节作用,揭示其在促进创面愈合中的作用.方法:模拟创面炎症微环境建立3个细胞模型:由肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)刺激的HSFb模型,佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)活化的THP-1细胞模型和HSFb、THP-1共培养细胞模型.AKBA、ATO与这3个细胞模型共同孵育24 h后,分别用酶联免疫吸附测定(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)法和明胶酶谱法检测细胞培养上清中MMP-1、MMP-2和MMP-9的含量及MMP-2和MMP-9的活性;逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测细胞中MMP-1、MMP-2和MMP-9 mRNA的表达情况;ELISA法检测各细胞模型炎性因子TNF-α和白细胞介素-1β(interleukin-1beta,IL-1β)的分泌量;蛋白印迹法检测细胞中细胞外信号调节蛋白激酶1/2(extracellular signal-regulated kinases 1 and 2,ERK1/2)及p38丝裂原激活的蛋白激酶(p38mitogen-activated proteinkinase,p38MAPK)磷酸化水平.结果:AKBA与ATO配伍对TNF-α刺激后的HSFb、PMA活化的THP-1细胞以及细胞共培养体系产生的MMP-1、MMP-2和MMP-9分别在活性、含量和mRNA水平有一定抑制作用(P<0.05,P<0.01);同时,AKBA与ATO配伍可降低THP-1细胞和共培养体系中TNF-α和IL-1β的分泌(P<0.01),并降低HSFb和THP-1细胞中ERK1/2及p38MAPK磷酸化水平(P<0.05,P<0.01).结论:AKBA与ATO配伍应用可能是通过抑制炎症状态下细胞炎症因子释放及抑制p38MAPK信号转导通路,使成纤维细胞和炎性细胞产生MMP减少,从而发挥活血化腐、促进创面愈合的作用.
目的:探討乳香、砒石主要單體成分11-羰基-β-乙酰乳香痠(acetyl-11-keto-beta-boswellic acid,AKBA)與三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)配伍對人皮膚成纖維細胞(human skin fibroblast,HSFb)、人單覈細胞繫THP-1細胞基質金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-1、MMP-2和MMP-9的調節作用,揭示其在促進創麵愈閤中的作用.方法:模擬創麵炎癥微環境建立3箇細胞模型:由腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)刺激的HSFb模型,彿波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)活化的THP-1細胞模型和HSFb、THP-1共培養細胞模型.AKBA、ATO與這3箇細胞模型共同孵育24 h後,分彆用酶聯免疫吸附測定(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)法和明膠酶譜法檢測細胞培養上清中MMP-1、MMP-2和MMP-9的含量及MMP-2和MMP-9的活性;逆轉錄聚閤酶鏈式反應(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測細胞中MMP-1、MMP-2和MMP-9 mRNA的錶達情況;ELISA法檢測各細胞模型炎性因子TNF-α和白細胞介素-1β(interleukin-1beta,IL-1β)的分泌量;蛋白印跡法檢測細胞中細胞外信號調節蛋白激酶1/2(extracellular signal-regulated kinases 1 and 2,ERK1/2)及p38絲裂原激活的蛋白激酶(p38mitogen-activated proteinkinase,p38MAPK)燐痠化水平.結果:AKBA與ATO配伍對TNF-α刺激後的HSFb、PMA活化的THP-1細胞以及細胞共培養體繫產生的MMP-1、MMP-2和MMP-9分彆在活性、含量和mRNA水平有一定抑製作用(P<0.05,P<0.01);同時,AKBA與ATO配伍可降低THP-1細胞和共培養體繫中TNF-α和IL-1β的分泌(P<0.01),併降低HSFb和THP-1細胞中ERK1/2及p38MAPK燐痠化水平(P<0.05,P<0.01).結論:AKBA與ATO配伍應用可能是通過抑製炎癥狀態下細胞炎癥因子釋放及抑製p38MAPK信號轉導通路,使成纖維細胞和炎性細胞產生MMP減少,從而髮揮活血化腐、促進創麵愈閤的作用.
목적:탐토유향、비석주요단체성분11-탄기-β-을선유향산(acetyl-11-keto-beta-boswellic acid,AKBA)여삼양화이신(arsenic trioxide,ATO)배오대인피부성섬유세포(human skin fibroblast,HSFb)、인단핵세포계THP-1세포기질금속단백매(matrix metalloproteinase,MMP)-1、MMP-2화MMP-9적조절작용,게시기재촉진창면유합중적작용.방법:모의창면염증미배경건립3개세포모형:유종류배사인자-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)자격적HSFb모형,불파지(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)활화적THP-1세포모형화HSFb、THP-1공배양세포모형.AKBA、ATO여저3개세포모형공동부육24 h후,분별용매련면역흡부측정(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)법화명효매보법검측세포배양상청중MMP-1、MMP-2화MMP-9적함량급MMP-2화MMP-9적활성;역전록취합매련식반응(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)검측세포중MMP-1、MMP-2화MMP-9 mRNA적표체정황;ELISA법검측각세포모형염성인자TNF-α화백세포개소-1β(interleukin-1beta,IL-1β)적분비량;단백인적법검측세포중세포외신호조절단백격매1/2(extracellular signal-regulated kinases 1 and 2,ERK1/2)급p38사렬원격활적단백격매(p38mitogen-activated proteinkinase,p38MAPK)린산화수평.결과:AKBA여ATO배오대TNF-α자격후적HSFb、PMA활화적THP-1세포이급세포공배양체계산생적MMP-1、MMP-2화MMP-9분별재활성、함량화mRNA수평유일정억제작용(P<0.05,P<0.01);동시,AKBA여ATO배오가강저THP-1세포화공배양체계중TNF-α화IL-1β적분비(P<0.01),병강저HSFb화THP-1세포중ERK1/2급p38MAPK린산화수평(P<0.05,P<0.01).결론:AKBA여ATO배오응용가능시통과억제염증상태하세포염증인자석방급억제p38MAPK신호전도통로,사성섬유세포화염성세포산생MMP감소,종이발휘활혈화부、촉진창면유합적작용.
