中国中西医结合急救杂志
中國中西醫結閤急救雜誌
중국중서의결합급구잡지
INTEGRATED TRADITIONAL CHINESE AND WESTERN MEDICINE IN PRACTICE OF CRITICAL CARE MEDICINE
2009年
5期
275-277,插1
,共4页
高糖%衰老%端粒酶%一氧化氮合酶%一氧化氮%活性氧
高糖%衰老%耑粒酶%一氧化氮閤酶%一氧化氮%活性氧
고당%쇠로%단립매%일양화담합매%일양화담%활성양
目的 观察高糖加速内皮细胞衰老过程中细胞内活性氧(ROS)水平和一氧化氮合酶/一氧化氮(NOS/NO)系统的变化.方法 将正常浓度糖(5.5 mmol/L)和高浓度糖(分别为11、22、33 mmol/L)培养液作用于人脐静脉内皮细胞48 h后,用β-半乳糖苷酶(β-gal)染色鉴定衰老细胞,用聚合酶链反应-酶联免疫吸附法(PCR-ELISA)检测端粒酶活性,用硝酸盐还原酶法检测细胞上清液总NO水平,用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)分析内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达,用荧光酶标仪检测细胞内NOS活性,用流式细胞仪检测细胞内ROS水平.结果 高糖培养液作用于内皮细胞48 h后,与对照组比较,随糖浓度升高内皮细胞β-gal染色阳性细胞数明显增多,端粒酶活性下降,细胞NO合成减少,NOS活性被抑制,细胞内ROS水平明显升高(P<0.05或P<0.01),但eNOS蛋白表达变化不明显.结论 高糖加速内皮细胞衰老进程,其作用机制可能与增强氧化应激,抑制NOS/NO系统有关.
目的 觀察高糖加速內皮細胞衰老過程中細胞內活性氧(ROS)水平和一氧化氮閤酶/一氧化氮(NOS/NO)繫統的變化.方法 將正常濃度糖(5.5 mmol/L)和高濃度糖(分彆為11、22、33 mmol/L)培養液作用于人臍靜脈內皮細胞48 h後,用β-半乳糖苷酶(β-gal)染色鑒定衰老細胞,用聚閤酶鏈反應-酶聯免疫吸附法(PCR-ELISA)檢測耑粒酶活性,用硝痠鹽還原酶法檢測細胞上清液總NO水平,用蛋白質免疫印跡法(Western blotting)分析內皮型一氧化氮閤酶(eNOS)蛋白錶達,用熒光酶標儀檢測細胞內NOS活性,用流式細胞儀檢測細胞內ROS水平.結果 高糖培養液作用于內皮細胞48 h後,與對照組比較,隨糖濃度升高內皮細胞β-gal染色暘性細胞數明顯增多,耑粒酶活性下降,細胞NO閤成減少,NOS活性被抑製,細胞內ROS水平明顯升高(P<0.05或P<0.01),但eNOS蛋白錶達變化不明顯.結論 高糖加速內皮細胞衰老進程,其作用機製可能與增彊氧化應激,抑製NOS/NO繫統有關.
목적 관찰고당가속내피세포쇠로과정중세포내활성양(ROS)수평화일양화담합매/일양화담(NOS/NO)계통적변화.방법 장정상농도당(5.5 mmol/L)화고농도당(분별위11、22、33 mmol/L)배양액작용우인제정맥내피세포48 h후,용β-반유당감매(β-gal)염색감정쇠로세포,용취합매련반응-매련면역흡부법(PCR-ELISA)검측단립매활성,용초산염환원매법검측세포상청액총NO수평,용단백질면역인적법(Western blotting)분석내피형일양화담합매(eNOS)단백표체,용형광매표의검측세포내NOS활성,용류식세포의검측세포내ROS수평.결과 고당배양액작용우내피세포48 h후,여대조조비교,수당농도승고내피세포β-gal염색양성세포수명현증다,단립매활성하강,세포NO합성감소,NOS활성피억제,세포내ROS수평명현승고(P<0.05혹P<0.01),단eNOS단백표체변화불명현.결론 고당가속내피세포쇠로진정,기작용궤제가능여증강양화응격,억제NOS/NO계통유관.
