基因组学与应用生物学
基因組學與應用生物學
기인조학여응용생물학
GENOMICS AND APPLIED BIOLOGY
2009年
3期
471-476
,共6页
张文%姚淑霞%谢柳%杨明坤%王锐萍%叶大维%方宣钧
張文%姚淑霞%謝柳%楊明坤%王銳萍%葉大維%方宣鈞
장문%요숙하%사류%양명곤%왕예평%협대유%방선균
苏云金芽孢杆菌%S1478-1分离株%cry1Ac同源基因%生物测定%基因登录号GQ227507
囌雲金芽孢桿菌%S1478-1分離株%cry1Ac同源基因%生物測定%基因登錄號GQ227507
소운금아포간균%S1478-1분리주%cry1Ac동원기인%생물측정%기인등록호GQ227507
本研究对从海南岛尖峰岭热带雨林自然保护区的土壤样品中分离出的Bt菌株S1478-1进行了特性鉴定,研究表明S1478-1分离株菌落形态和生长特征和Bt参照菌株HD73极其相似.16S rDNA序列分析表明,S1478-1分离株与其它B.thuringiensis、B.cereus和B.anthracis的16S rDNA序列相似性达到99%.分离株能产菱形伴胞晶体,SDS-PAGE蛋白电泳分析表明,菌株在生长后期,形成芽孢同时分泌130 kD大小的晶体蛋白.生物测定表明S1478-1分离株对小菜蛾具有很高的毒杀活性,LC50卯值高达5.159 ×108cfu/mL.初步显示S1478-1分离株可作为防治鳞翅目害虫的生物农药菌株.利用PCR-RFLP方法鉴定S1478-1分离株含有cry1Ac同源基因,以PCR粘性端克隆方法扩增全长基因,序列测定表明该基因ORF为3 537bp,编码1178个氨基酸,推定的编码蛋白分子量为133.3 kD,与其它cry1Ac基因序列最高达到99%同源,因此,该基因可作为杀虫工程菌及培育转基因抗虫作物的候选基因.
本研究對從海南島尖峰嶺熱帶雨林自然保護區的土壤樣品中分離齣的Bt菌株S1478-1進行瞭特性鑒定,研究錶明S1478-1分離株菌落形態和生長特徵和Bt參照菌株HD73極其相似.16S rDNA序列分析錶明,S1478-1分離株與其它B.thuringiensis、B.cereus和B.anthracis的16S rDNA序列相似性達到99%.分離株能產蔆形伴胞晶體,SDS-PAGE蛋白電泳分析錶明,菌株在生長後期,形成芽孢同時分泌130 kD大小的晶體蛋白.生物測定錶明S1478-1分離株對小菜蛾具有很高的毒殺活性,LC50卯值高達5.159 ×108cfu/mL.初步顯示S1478-1分離株可作為防治鱗翅目害蟲的生物農藥菌株.利用PCR-RFLP方法鑒定S1478-1分離株含有cry1Ac同源基因,以PCR粘性耑剋隆方法擴增全長基因,序列測定錶明該基因ORF為3 537bp,編碼1178箇氨基痠,推定的編碼蛋白分子量為133.3 kD,與其它cry1Ac基因序列最高達到99%同源,因此,該基因可作為殺蟲工程菌及培育轉基因抗蟲作物的候選基因.
본연구대종해남도첨봉령열대우림자연보호구적토양양품중분리출적Bt균주S1478-1진행료특성감정,연구표명S1478-1분리주균락형태화생장특정화Bt삼조균주HD73겁기상사.16S rDNA서렬분석표명,S1478-1분리주여기타B.thuringiensis、B.cereus화B.anthracis적16S rDNA서렬상사성체도99%.분리주능산릉형반포정체,SDS-PAGE단백전영분석표명,균주재생장후기,형성아포동시분비130 kD대소적정체단백.생물측정표명S1478-1분리주대소채아구유흔고적독살활성,LC50묘치고체5.159 ×108cfu/mL.초보현시S1478-1분리주가작위방치린시목해충적생물농약균주.이용PCR-RFLP방법감정S1478-1분리주함유cry1Ac동원기인,이PCR점성단극륭방법확증전장기인,서렬측정표명해기인ORF위3 537bp,편마1178개안기산,추정적편마단백분자량위133.3 kD,여기타cry1Ac기인서렬최고체도99%동원,인차,해기인가작위살충공정균급배육전기인항충작물적후선기인.
