分子植物育种
分子植物育種
분자식물육충
MOLECULAR PLANT BREEDING
2009年
3期
437-443
,共7页
荣红颖%张立全%杨凤萍%陈绪清%张晓东%郭新梅
榮紅穎%張立全%楊鳳萍%陳緒清%張曉東%郭新梅
영홍영%장립전%양봉평%진서청%장효동%곽신매
小麦%转基因%SEWB1B基因%脯氨酸%抗旱性
小麥%轉基因%SEWB1B基因%脯氨痠%抗旱性
소맥%전기인%SEWB1B기인%포안산%항한성
本研究对基因枪导入了pBAC128F/R质粒(含有玉米Adh1内含子1的CaMV35S启动子驱动的bar基因作为选择标记,以来自拟南芥菜逆境诱导表达类型--亲水蛋白rd29b基因的启动子驱动脱水应答转录因子DREBIB基因的逆境诱导表达类型质粒)的T4代转基因小麦进行了稳定表达研究.PCR、PCR-Southem和Southern杂交分析表明,外源转录因子DREBlB基因已稳定整合到转基因株系的基因组中.半定量RT-PCR结果表明,部分转基因株系的DREB1B基因的相对表达量有所增强.叶片除草剂抗性检测结果显示有8个转基因株系可抗到150 mg/L.叶片脯氨酸含量测定结果表明,有4个株系(编号为1,18,30和76)的脯氨酸含量提高幅度较大,同一株系,干旱与未干旱处理相比,脯氨酸含量提高了3~5倍.干旱处理后的转基因植株与非转基因植株相比,脯氨酸含量高2~3倍.在干旱条件下,T4代田间小区产量统计数据分析结果表明,有4个转基因株系(编号为30,51,70和76)的产量与非转基因植株相比有显著增加.研究表明,利用逆境诱导型rd29b基因的启动子来增强外源DREB1B基因的表达,能显著改良小麦的抗旱性.
本研究對基因鎗導入瞭pBAC128F/R質粒(含有玉米Adh1內含子1的CaMV35S啟動子驅動的bar基因作為選擇標記,以來自擬南芥菜逆境誘導錶達類型--親水蛋白rd29b基因的啟動子驅動脫水應答轉錄因子DREBIB基因的逆境誘導錶達類型質粒)的T4代轉基因小麥進行瞭穩定錶達研究.PCR、PCR-Southem和Southern雜交分析錶明,外源轉錄因子DREBlB基因已穩定整閤到轉基因株繫的基因組中.半定量RT-PCR結果錶明,部分轉基因株繫的DREB1B基因的相對錶達量有所增彊.葉片除草劑抗性檢測結果顯示有8箇轉基因株繫可抗到150 mg/L.葉片脯氨痠含量測定結果錶明,有4箇株繫(編號為1,18,30和76)的脯氨痠含量提高幅度較大,同一株繫,榦旱與未榦旱處理相比,脯氨痠含量提高瞭3~5倍.榦旱處理後的轉基因植株與非轉基因植株相比,脯氨痠含量高2~3倍.在榦旱條件下,T4代田間小區產量統計數據分析結果錶明,有4箇轉基因株繫(編號為30,51,70和76)的產量與非轉基因植株相比有顯著增加.研究錶明,利用逆境誘導型rd29b基因的啟動子來增彊外源DREB1B基因的錶達,能顯著改良小麥的抗旱性.
본연구대기인창도입료pBAC128F/R질립(함유옥미Adh1내함자1적CaMV35S계동자구동적bar기인작위선택표기,이래자의남개채역경유도표체류형--친수단백rd29b기인적계동자구동탈수응답전록인자DREBIB기인적역경유도표체류형질립)적T4대전기인소맥진행료은정표체연구.PCR、PCR-Southem화Southern잡교분석표명,외원전록인자DREBlB기인이은정정합도전기인주계적기인조중.반정량RT-PCR결과표명,부분전기인주계적DREB1B기인적상대표체량유소증강.협편제초제항성검측결과현시유8개전기인주계가항도150 mg/L.협편포안산함량측정결과표명,유4개주계(편호위1,18,30화76)적포안산함량제고폭도교대,동일주계,간한여미간한처리상비,포안산함량제고료3~5배.간한처리후적전기인식주여비전기인식주상비,포안산함량고2~3배.재간한조건하,T4대전간소구산량통계수거분석결과표명,유4개전기인주계(편호위30,51,70화76)적산량여비전기인식주상비유현저증가.연구표명,이용역경유도형rd29b기인적계동자래증강외원DREB1B기인적표체,능현저개량소맥적항한성.