肿瘤
腫瘤
종류
TUMOR
2008年
12期
1019-1022
,共4页
曹阳%黄晓园%马全富%杨漾%庄亮%马丁%周剑峰
曹暘%黃曉園%馬全富%楊漾%莊亮%馬丁%週劍峰
조양%황효완%마전부%양양%장량%마정%주검봉
肿瘤,实验性%RNA干扰%细胞增殖%基因表达%基因%Smad4%细胞,ECV304
腫瘤,實驗性%RNA榦擾%細胞增殖%基因錶達%基因%Smad4%細胞,ECV304
종류,실험성%RNA간우%세포증식%기인표체%기인%Smad4%세포,ECV304
目的:探讨利用RNA干扰技术下调Smad 4基因表达对人脐静脉内皮细胞增殖和迁移能力的影响,初步了解Smad 4在血管生成中的作用.方法:设计并合成靶向人Smad 4基因的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)片段siRNA1和siRNA2,脂质体介导转染入人脐静脉内皮细胞株ECV304.应用实时定量RT-PCR和Western印迹法检测转染前后Smad4基因表达水平;应用细胞周期分析和羧乙基锗倍半氧化物(6-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFSE)-流式细胞仪检测ECV304细胞转染前后细胞增殖能力的变化;通过单层细胞划痕实验观察细胞转染前后迁移能力的变化.结果:从2条siRNA中成功筛选出1条siRNA,干RNA和蛋白水平可明显下调Smad4基因的表达;ECV304细胞转染Smad4的siRNA后,细胞的增殖和迁移能力明显增强.结论:利用RNA干扰技术能够筛选出高效的特异阻断Smad 4基因表达的siRNA;Smad 4基因表达下调能够明显促进血管内皮细胞的增殖和迁移.
目的:探討利用RNA榦擾技術下調Smad 4基因錶達對人臍靜脈內皮細胞增殖和遷移能力的影響,初步瞭解Smad 4在血管生成中的作用.方法:設計併閤成靶嚮人Smad 4基因的小分子榦擾RNA(small interfering RNA,siRNA)片段siRNA1和siRNA2,脂質體介導轉染入人臍靜脈內皮細胞株ECV304.應用實時定量RT-PCR和Western印跡法檢測轉染前後Smad4基因錶達水平;應用細胞週期分析和羧乙基鍺倍半氧化物(6-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFSE)-流式細胞儀檢測ECV304細胞轉染前後細胞增殖能力的變化;通過單層細胞劃痕實驗觀察細胞轉染前後遷移能力的變化.結果:從2條siRNA中成功篩選齣1條siRNA,榦RNA和蛋白水平可明顯下調Smad4基因的錶達;ECV304細胞轉染Smad4的siRNA後,細胞的增殖和遷移能力明顯增彊.結論:利用RNA榦擾技術能夠篩選齣高效的特異阻斷Smad 4基因錶達的siRNA;Smad 4基因錶達下調能夠明顯促進血管內皮細胞的增殖和遷移.
목적:탐토이용RNA간우기술하조Smad 4기인표체대인제정맥내피세포증식화천이능력적영향,초보료해Smad 4재혈관생성중적작용.방법:설계병합성파향인Smad 4기인적소분자간우RNA(small interfering RNA,siRNA)편단siRNA1화siRNA2,지질체개도전염입인제정맥내피세포주ECV304.응용실시정량RT-PCR화Western인적법검측전염전후Smad4기인표체수평;응용세포주기분석화최을기타배반양화물(6-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFSE)-류식세포의검측ECV304세포전염전후세포증식능력적변화;통과단층세포화흔실험관찰세포전염전후천이능력적변화.결과:종2조siRNA중성공사선출1조siRNA,간RNA화단백수평가명현하조Smad4기인적표체;ECV304세포전염Smad4적siRNA후,세포적증식화천이능력명현증강.결론:이용RNA간우기술능구사선출고효적특이조단Smad 4기인표체적siRNA;Smad 4기인표체하조능구명현촉진혈관내피세포적증식화천이.
